Liste des posters 2023
Cliquez sur l’icône pour visualiser le résumé du poster.
►Les pdf des posters seront disponibles au téléchargement sur cette plateforme post-congrès. Le dépôt de ces fichiers autorise par défaut leur mise en ligne.
► Les posters seront exposés pendant toute la durée du congrès du mercredi 15 novembre 8h30 au vendredi 17 novembre 13h30. 
Les posters non récupérés seront détruits et, par conséquent, aucun poster ne sera renvoyé.

► Les auteurs présentateurs devront se tenir devant leur poster pendant les pauses afin de répondre aux éventuelles questions des participants.

► Une session posters sera organisée le jeudi 16 novembre de 12h00 à 13h15.

► Afin de faciliter la lecture de votre poster, nous vous conseillons les dimensions suivantes : 120 à 140 cm de haut - 80 à 90 cm de large (format portrait - format utile d'affichage : Haut. 250 cm - Larg. 100 cm).
► Le matériel de fixation sera fourni sur place.

Background : Ponatinib (pona) is a multikinase inhibitor that is approved for the treatment of Philadelphia chromosome-positive acute lymphoblastic and chronic myelogenous leukemias. It has also activity against FLT3-mutants including ITD and ITD691L but not D835 within the Flt3 activation segment. Pona may then represent an alternative drug for maintenance after allo-SCT in FLT3-ITD+ AML patients.
Methods : This was a multicenter phase 2 non-randomized prospective study testing the efficacy and tolerability of pona after allo-SCT in FLT3-ITD+ AML patients (ClinicalTrial.gov ID : NCT03690115). The main objective was the incidence of relapse at 2 years post-transplant with the hypothesis that this incidence at 2 years will be reduced at 15% instead of 30%. Seventy-seven patients had to be included. Inclusion criteria were all patients, aged between 18 and 70 yo, with a FLT-3 ITD+ AML in cytologic complete remission (<5% of bone marrow blasts) and a documented engraftment at the time of starting pona after an allo-SCT using any type of conditioning regimen and donor. A controlled GVHD were mandatory as well as a platelets count ≥70 Giga/l and a neutrophils count ≥ 1 Giga/l at time of inclusion. The study was supported by Incyte.
Initially, pona administration had to start between day +60 and +90/100 at the dose of 30 mg/day for 1-year. However, because of excesssive hematopoietic toxicity, an amendment was made after the 14th patient to start pona between day 100 and day 120 post-allo. a. During the study, It was allowed to restart pona at a 15 mg/day after resolution of 30 mg dose related toxicities. After 1 year of pona it was not allowed to start a new FLT3 inhibitor or pursue pona.
Results : Twenty-three patients were included between December 2019 and April 2022. Among them, 22 were effectively treated. Indeed, the last patient included did not receive pona due to hepatic abnormalities incompatible with the start of pona. Also, because of a very low rate of enrollment, the trial was closed prematurely in accordance with the sponsor in December 2022. Results for the 22 treated patients are reported here. Patient characteristics are given in Table 1. With a median follow-up of 740 days (range : 374-930), 1-y and 2-y overall survival  were 81.3% (66.3-99.6) and 63.9% (45.4-90.0), and 1-y and 2-y leukemia-free survival were 54.5% (37.2-79.8) and 49% (31.8-75.7), respectively. Ten relapses occured at a median of 186 days (range=69-481) after allo-SCT with a CI of relapse of 45.5% at 2 years.
Pona was started at a median of 69 days post-allo-SCT (range : 60-130). The median duration of treatment was 75.5 days (range : 4-369). Only 3 patients received one year of treatment at 30 mg/day as required by the protocol. The reasons for stopping pona were toxicity in 11 patients, relapse in 6, toxicity then relapse in 1, GVHD then relapse in 1. Among the 13 patients who stopped pona for toxicity or GVHD, 6 restarted pona (15 mg n=5, 30 mg n=1) then stoppped again for toxicity (n=4) or progression (n=2).
A total of 36 adverse events related to pona were documented in 17 patients. The majority was grade 1 or 2 (n=27, 75%) while 6 grade 3 (17%) and 3 grade 4 (8%) occured. (Table 2)
Conclusion :  Ponatinib administration after allo-SCT is associated with toxicity and do not reduce relapse or improve survival in this small cohort of FLT3+ AML patients. Other FLT3 inhibitors have to be considered in FLT3+ AML patients for maintenance after allo-SCT.
 

Tables

Conclusion
Non

Background : Sequential allogeneic stem cell transplantation (Seq allo-SCT) is characterized by the use of a renforced conditioning regimen combining a debulking chemotherapy followed after 3 days of rest by the conditioning regimen itself, to fit and relatively young patients with refractory hematologic malignancies. However, the results overall remain dismal as only a small proportion of patients are finally cured. Recently, a combination of thiotepa, etoposide, cyclophosphamide (TEC) followed by fludarabine/busulfan/ATG (FB2A2) using any type of donor for refractory hematologic malignancies have shown some promising results (Dulery, 2018). As clofarabine may have better antileukemic effect than fludarabine, we have investigated in our patients with refractory AML a new sequential approach combining TEC+clofarabine/busulfan/ATG (TEC/CloB2A2).
Methods : We have investigated in our Hematology Department a new sequential conditioning regimen replacing fludarabine by clofarabine in a cohort of patients with refractory AML. The TEC/CloB2A2 regimen consisted of Thiotepa 5 mg/kg at day(d)-13, Cyclophosphamide 400 mg/m²/d from d-12 to d-9 and Etoposide phosphate 100 mg/m²/d from d-12 to d-9, followed after 3 days of rest, by Clofarabine 30 mg/m²/d from d-5 to d-1, Busulfan 3,2 mg/kg/d d-5 and d-4 and Thymoglobuline 2,5 mg/kg/d d-3 and d-2. GVHD prophylaxis consisted of high-dose of post-transplant Cyclophosphamide (PTCY) 50 mg/kg/d at d+3 and d+5 in combination with mycophenolate mofetyl and cyclosporine from d+6. Any type of donor have been considered.
Results :  Between February 2020 and August 2022, 12 patients have been treated (table 1). Median age was 58 years (y) old. The majority of patients had primary refractory AML (n=9). This was the first transplant for all patients. One patient needed desensibilization before conditioning due to high level of anti-HLA antibodies directed against the donor. All but 2 donors were haploidentical. One patient with a matched donor did not receive PTCY after transplant.
Two patients died during the aplasia phase (D+6 : sepsis, D+30 : fungal infection). The median time of neutrophils (> 1 Giga/L) and platelets (> 50 Giga/L) recoveries were 22 days (range : 12-137) and 34 days (range : 16-241), respectively. There were no primary or secondary graft failures. Responses were evaluated at a median of 57 days (range : 26-70) after transplant. Five complete remission (CR), 3 CR with incomplete platelet recovery and two failures were documented for an overall CR/CRp rate of 67%. Only one cutaneous grade 2 acute GVHD occured after transplant but no chronic GVHD. Six patients received maintenance treatment after transplant to prevent relapse using 5’aza alone in 1, 5 aza+ DLI in 2, DLI alone in 1. The last two patients received maintenance as part of a trial. The three patients receiving DLI developped acute GVHD thereafter including 2 grade 2 and one grade 3.
Six of the patients achieving CR/CRp relapsed (75%) at a median of 160 days (range : 48-344). At last follow-up (July 2023), only one patient is alive in CR (8%) at 795 days from tranplant (SET/CLoB2A2 +PTCY and sibling donor, grade 3 acute GVHD after DLI). 1-y and 2y overall and leukemia survival were both at 25% (9.3-66.6) and 8.3% (1.2-54.4), respectively.
Conclusion : The results of this small cohort showed that a sequential TEC/CloB2A2 conditioning regimen do not provide better outcomes compared to a TEC/FB2A2 for refractory AML patients.

Patient characteristics

LFS and OS

Conclusion
Non

Background
The impact of pre-graft immune status on outcomes in recipients of allogeneic stem cell transplant (allo-SCT) has not been explored.

Patients and Methods
A retrospective study was conducted on adults who underwent peripheral blood (PB) allo-SCT for hematological malignancy between May 2017 and December 2021 in our department. Pre-transplant immune metrics, including lymphocyte subsets and monocyte counts, were analyzed. The impact of these metrics on key outcomes was assessed based on disease and donor type.

Results
Of 264 patients (a median age: 59), a majority had myeloid malignancies (75%), received a matched donor graft (64%), and a reduced-intensity conditioning regimen (80%, Table). The 3-year (y) overall survival (OS), progression-free survival (PFS), and GVHD-free, progression-free survival (GRFS) were respectively 53%, 46% and 31%, while 3-y non-relapse mortality (NRM) and relapse incidence (RI) were 28% and 25%. Patients with myeloid malignancy exhibited notably higher T and B cell counts, reflecting probably the less immunosuppressive intensity of chemotherapies received before transplant (Table).
Considering myeloid malignancies, OS and NRM were not impacted by the pre-graft immune status. In multivariate analysis, adjusting for disease type, status, donor type (sibling versus [vs] unrelated), and conditioning (RIC vs MAC vs sequential), a higher ALC was associated with significant lower PFS (hazard ratio [HR] 1.39, 95%CI: 1.11-1.74, p=0.004) and GRFS (HR: 1.30, 1.07-1.59, p=0.009), and a significant higher risk of relapse (HR 1.85, 1.32-2.59, p=<0.001), but this was true only in case of a matched transplant. Interestingly, T-cell subsets were associated with relapse (CD3: HR 1.94, p<0.001; CD4: HR 2.34, p=0.004; CD8: HR 2.34, p<0.001), but not B-cells (HR 2.23, p=0.56), gamma-globulin levels (HR 0.98, p=0.68), nor NK-cells (HR 2.72, p=0.17). T cell subsets, B cells, NK cells, gamma-globulin and monocytes were not associated with PFS and GRFS.
Also, to highlight the adverse effect of an elevated ALC, and using a ROC curve, a threshold of 1.23 Giga/L was retained as the best cut-off to predict relapse. This was then applied to create a visual comparison of PFS, GRFS and RI (Figure), revealing an early increased RI in patients with ALC > 1.23 Giga/L (3-month relapse rate: 13% vs 2.3%, p=0.03).
Finally, the pre-graft immune status did not impact the outcomes of patients receiving a PB haplotransplant for a myeloid malignancy. This was true also for those who received a PB matched or again a haploidentical transplant for a lymphoid disease.

Conclusions
This retrospective analysis suggests that higher ALC at transplant predicts lower PFS and GRFS due to higher RI in adults receiving a PB matched transplant for a myeloid malignancy. Patients with a myeloid malignancy had also a better immune status at transplant which may reflect less immunosuppressive treatments received before transplant. Paradoxically, this better immune status may interfere with allogeneic T lymphocytes by reducing the graft-versus-leukemia effect. Thus, increasing immunosuppression (via the conditioning or drugs used for GVHD prophylaxis) may improve outcome in some specific sub-groups of patients with higher autologous T lymphocytes at transplant.

Table. Patient Characteristics.

Figure. Comparison of disease-free survival (DFS), GVHD-progression free survival (GRFS), and relapse incidence according to pre-graft absolute lymphocyte count (ALC).

Conclusion
Non

Introduction : L’hémoglobinurie paroxystique nocturne (HPN) est une affection clonale non maligne, rare, caractérisée par une hémolyse intra vasculaire, une thrombose et une cytopénie périphérique. L’allogreffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH) reste le seul traitement curatif par l’élimination du clone défectueux. Nous rapportons les résultats d’allogreffe de CSH réalisées chez 26 patients (pts).
Matériels et méthodes : Sur une période de 192 mois (de mars 2007 à Mars 2023), 26 pts atteints d’HPN ont bénéficié d’une allogreffe génoidentique. Elle était de forme aplasique chez 19 pts et de forme hémolytique chez 07 pts. L’âge moyen est de 29 ans (19-39), le sex-ratio (H/F) est de 1. L’intervalle diagnostic greffe est en moyenne de 24 mois (3-108). Préalablement à la greffe, 15 pts (57,7%)  ont reçu un traitement immunosuppresseur et un programme transfusionnel régulier a été appliqué chez 25 pts (96,1%). Un seul patient a bénéficié d’un traitement court par Eculizumab. Deux types de conditionnement ont été utilisés : Endoxan (200 mg/m2) chez 05 pts et Busilvex (12,8 mg/kg) associé à Endoxan (120 mg/Kg) chez 20 pts. La prophylaxie GVHD  a associé ciclosporine et méthotréxate chez tous les pts. Les greffons utilisés ont été des cellules souches périphériques (CSP) avec un taux moyen de cellules CD34+ de 6,99.1O6/Kg (3,19-16,93). Au 30/06/23, le recul minimum est de trois mois et le recul maximum est de 195 mois.
Résultats : Le délai moyen de sortie d’aplasie est de 14 jours (11-28). Tous les pts ont reçu des transfusions avec une moyenne/pt de 6 culots globulaires (3-25) et 3 concentrés plaquettaires (1-20). Une GVHD aigue a été observée chez 5 pts (19,23%) de grade II-IV chez tous les pts. La GVHD chronique chez 5 pts (26,3%) dont 4 extensives (21%). La réactivation CMV a été observée chez 6 pts (23%). La cystite hémorragique est survenue chez 2 pts (7,7%). Le rejet du greffon a été observée 4 pts (15,4%) dont 2 sont vivants (après Boost : 1, après 2ème allogreffe : 1). Après un suivi médian de 52 mois (3-300), 18 pts (69,23%) sont vivants avec clone HPN négatif et 7 pts (26,92%) sont décédés (GVHD 3, infection 3, rejet 1). Les survies actuarielles globale (SG) et sans rejet (SSR) sont respectivement de 74,94 % et 62,5%.
Conclusion : L’allogreffe de CSH est aujourd’hui le seul traitement qui permet de guérir l'HPN mais n'est indiquée que si une aplasie médullaire sévère ou un syndrome myélodysplasique est associé du fait de la corbi-mortalité liée à cette procédure. Elle se discute également dans les autres formes lorsque le traitement inhibiteur du complément n’est pas disponible.
Conclusion
Non

Introduction : L’aplasie médullaire (AM) est une hémopathie non maligne, rare, due à une insuffisance médullaire quantitative, secondaire à la disparition complète ou partielle du tissu hématopoïétique responsable de cytopénies périphériques. L’allogreffe de CSH constitue le traitement de référence en cas de disponibilité d’un donneur HLA identique intrafamilial chez les patients (pts) de moins de 40 ans. Nous exposons ici le devenir des pts proposés à la greffe sur une période de 3 ans. 

Matériel et méthodes : Durant la période allant de Janvier 2020 à Décembre 2022, un total de 209 dossiers de pts atteints d’AM acquise ont été adressés pour allogreffe provenant des services d’hématologie et pédiatrie des différentes régions du pays : 75 pts (35,8%) du Centre, 74 pts (35,4%) de l’Est, 30 pts (14,3%) de l’Ouest et 30 pts (14,3%) du Sud. Le comité greffe, réuni chaque semaine, décide de l’indication de greffe, des rendez-vous de typage HLA, du bilan prégreffe et de la date d’hospitalisation pour greffe. La décision est, à chaque fois, notifiée au médecin traitant. 
Résultats : L’âge moyen des patients est de 6 ans (2-46) dont 108 pts (52%) ont moins de 18 ans, 96 pts entre 18 et 40 ans et 5 pts de plus de 40 ans. Le sex-ratio (H/F) est de 1.4. Après étude des dossiers, l’indication est posée chez 188 pts et récusée chez 21 pts (10%) en raison de l’âge (< 3 ans ou > 40 ans), la forme modérée ou l’absence de donneur potentiel (enfant unique). Onze pts ont été adressés avec donneurs sur un typage HLA déjà effectué dans un autre service et les autres ont bénéficié d’un rendez-vous programmé dans un délai moyen de 7 jours (2-21). Un donneur HLA-compatible est retrouvé chez 101 pts (57,3%) sur un total de 176 (12 pts sont malheureusement décédés avant la réalisation du typage). Le bilan pré-greffe (BPG) est programmé et réalisé, dès réception du résultat, après un délai médian de 8 jours (4-38) chez 99 (98%) couples donneur/receveur (2 pts sont décédés avant le BPG). Durant les différentes étapes, le décès est survenu chez 32 pts (12 pts avant le typage, 2 pts avant le BPG et 18 pts avant la greffe). Au final, 70 pts (37,2% de l’ensemble des pts retenus et 69,3% avec donneur) ont bénéficié d’une allogreffe géno-identique après un délai moyen de 58 jours (23-177) après la soumission et 30 jours (13-133) après le BPG.

Conclusion : L’allogreffe de CSH est le seul traitement curateur de l’AM sévère ou très sévère chez les pts jeunes avec des résultats excellents. La réussite de cette procédure dépend de facteurs liés au receveur, la disponibilité d’un donneur HLA identique intra-familial mais également du délai de sa réalisation en raison du risque élevé d’infections sévères potentiellement mortelles. 

Conclusion
Non

Introduction :
Disponible un an après le début de la pandémie en janvier 2021, la vaccination a permis de diminuer drastiquement l’incidence de formes sévères et létales d’infection COVID-19 aussi bien dans la population générale que chez les patients immunodéprimés, notamment les receveurs d’une allogreffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH). Ces patients (pts) ont d’abord été vaccinés en post-greffe mais rapidement les donneurs et receveurs ont pu recevoir un vaccin en pré-greffe. Cependant, l’impact de la vaccination ou d’une infection avant greffe, chez le receveur ou le donneur, a peu été évaluée.
Méthodes :
L’impact d’une vaccination ou infection COVID-19 pré-greffe chez des adultes allogreffés dans notre service entre octobre 2020 et mars 2023 avec un suivi d’au moins 3 mois post-greffe a été évalué. Les données ont été collectées jusqu’en juillet 2023. Trois groupes ont été définis : 1) Pts ou donneurs non vaccinés non infectés avant greffe 2) pts et/ou donneurs vaccinés sans infection avant greffe 3) pts et/ou donneurs avec infection, vaccinés ou non avant greffe. L’infection sévère ou non post-greffe a été collectée pour chaque patient. Une infection entrainant une hospitalisation, soins intensifs inclus et/ou le décès est définie comme sévère.Certains pts ont reçu du tixagevimab+cilgavimab (Tix/cil) en prophylaxie post-greffe pendant la vague Delta.
Résultats :
157 pts au total ont été inclus, leurs caractéristiques de base sont décrites dans le Tableau 1. Le taux de vaccination post-greffe était de 100%, 50%, 32% dans le groupe 1, 2, 3 respectivement. La plupart des pts ont été greffés et suivi pendant les vagues Delta et Omicron. La première vaccination post-greffe a été réalisée à une médiane de 168 jours (étendue : 27-482) et les infections COVID-19 à une médiane de 312 jours (0-1027). Les résultats sont décrits dans le Tableau 2.
Le taux d’infections, les formes sévères et les décès liés au COVID-19 étaient respectivement de 35%, 9.5% et 3% dans toute la cohorte. La vaccination post-greffe était associée à une protection contre l’infection (20% chez les vaccinés vs 62.5% chez les non vaccinés, p<0.001). Cependant, les taux d’infections sévères et de décès liés au COVID-19 étaient similaires entre ces deux groupes.
Les taux d’infections COVID-19 étaient de 24%, 31% et 32% dans les groupes 1, 2, 3 respectivement. Les formes sévères et décès étaient également similaires entre les groupes à 12%, 11% et 3%, et 3%, 3% et 3%, respectivement.
Les pts dans leur première année de greffe n’avaient pas plus de risque d’infection COVID-19 (sévère ou non). Le Tix/cil était principalement administré chez les non vaccinés post-greffe, sans différence d’infection par rapport aux pts n’en recevant pas. Ces derniers étant majoritairement vaccinés post-greffe (90%), cela confirme que le Tix/cil était aussi efficace que le vaccin pendant la vague Delta pour protéger les pts non vaccinés en post-greffe.
Conclusion :
Dans cette étude, la vaccination post-allogreffe de CSH paraît d’une importance cruciale pour protéger les pts contre le COVID-19. La vaccination ou l’infection COVID-19 pré-greffe ne sont pas associées à une réduction du risque d’infection sévère ou non chez les pts vaccinés post-greffe, suggérant qu’elle est suffisante pour apporter une protection efficace dans cette population.

Tableau 1 : Caractéristiques des patients

Tableau 2 : Infections COVID-19 post-greffe selon le statut vaccinal pré et post-greffe l’antécédent d’infection avant greffe

Conclusion
Non

Among porphyria, the congenital erythropoietic porphyria (CEP) is the rarest porphyrias, with a prevalence estimated at 1 or less per million individuals per year. This congenital autosomal recessive disease is most often due to homozygous or compound heterozygous mutations in the UROIIIS gene on chromosome. Porphyrins first accumulate in erythroid precursors, then are released in plasma by hemolysis, diffuse and accumulate in tissues. Clinical manifestations begin at various ages, ranging from intrauterine (hydrops foetalis) to neonatal, childhood and even adulthood. Severe cases are characterized by extreme photosensitivity, causing skin infections, liver injury, osteoporosis and fractures associated with bone marrow hyperplasia and by hemolytic anemia which could evolve into pancytopenia. Successful experiences with Allo-SCT have been reported in children. However, at our knowledge, no such data exist in adults with CEP. 

Here we report for the first time the successful cure of a 46-year old man with CEP with a 5-year follow-up after Allo-SCT.

The patient has given its consent to report on his medical case. He’s a male patient who was diagnosed with CEP at the age of 3 years old.he presented with progressively worsening cutaneous and ophthalmological symptoms with severe photosensitivity, diffuse sclerotic plaques, chronic wounds on ears and hands requiring multiple amputations and corneal transplants.  He was addressed in our Hematology Department at the age of 44 years because of the apparition of a mild pancytopenia (Hb at 8.6 g/dL, platelet at 100 Giga/L and neutrophiles at 1.3 Giga/L). The bone marrow aspiration showed a normal cellularity with no excess of blasts, but ≥ 20% of erythroid dysplasia without granulocytic or megakaryocytic dysplasia. Medullary karyotype was normal. As the patient needed red blood cells transfusions the decision to proceed to Allo-SCT was made. 

The ASCT was performed in the Hematology Department in Nantes University Hospital at the age of 46 yo with a matched unrelated donor. A myeloablative conditioning regimen (“FB4”) was used consisting of fludarabine 30mg/m2/day (d) (d-6 to d-2) + busulfan 3.2mg/kg/d (d-6 to d-3). Graft source was peripheral blood stem cells. Thymoglobuline 2.5mg/kg/d (d-2 to d-1), cyclosporine and mycofenolate mofetil were used as GVHD prophylaxis. Engraftment was documented at day+30 with a full donor chimerism and normalization of complete blood counts. No serious adverse event occurred. A grade 3 acute GVHD of the gut was documented and treated with success with corticosteroids. The patient was free of all systemic immunosuppressive treatments at month+7. A mild ocular chronic GVHD developed few months later and persists currently but is controlled by local immunosuppressive eye drops.

We were able to perform various porphyrin assays during the follow-up after Allo-SCT (table) 

From the clinical point of view, after 5 years, no more skin fragility, excoriation, wound, or chondritis of the nose and ears are present. Pain has disappeared, sclerotic skin lesions reduced with no discomfort anymore. Photosensitivity disappeared and the patient is now able to swim and to wear t-shirt.  

In conclusion, to our knowledge, this is the first reported and successful case of Allo-SCT in an adult with CEP. This suggest that Allo-SCT could be considered in children with non-severe CEP showing progressive aggravation of the disease at adult age. 

table

Conclusion
Non

Introduction : La place et les indications de l'allogreffe (allo HSCT) dans la LLC restent à définir à l’avenement des thérapies ciblées (TC) (inhibiteurs BTK (BTKi); inhibiteurs BCL2 (BCL2i)). Les double réfractaires BTKi, BCL2i ont un pronostic sombre et la place de allo HSCT reste controversée dans ce cas [1-4]. L'objectif principal cette etude était d'évaluation est la survie globale, secondairement l'incidence cumulée de la rechute, de la mortalité sans rechute, réaction du greffon contre l’hôte aiguë (aGVHD) et chronique cGVHD.
Matériel & Méthode: c'était une étude rétrospective monocentrique sur l'ensemble des patients LLC traités par allo HSCT inclus dans la base Promise IPC. Les patients ont donné leur consentement dans le registre pour des études sur le devenir clinique post greffe. 
Résultat : Cinquante patients LLC 34 hommes et 16 femmes ont bénéficié une allo HSCT entre novembre 1997 et janvier 2021. L'âge médian à la greffe et au diagnostic était de 59.2 ans (27.3-68.2) et 49.4 ans (25.08 - 65.11). La durée médiane du diagnostic à l'allo HSCT était de 72mois (12-216mois). Dix patients (20%) avaient un score de Sorror supérieur ou égal à 3. Les patients ont reçu une médiane de 3 lignes (1-6) thérapies. Trentre quatre patients (68%), étaient réfractaires à la fludarabine. Dans le traitement pré Allo HSCT, six patients étaient sous nouvelles TC (3 (BTKi, 3 BCL2i) dont 4 ayant reçu au moins 2 lignes. 
La FISH LLC pré greffe était disponible chez 35 patients dont 19 del 17p/TP53. Le statut IGHV était non muté chez 4 et muté chez 7 patients. Le Caryotype était disponible chez 23 patients, dont 3 caryotypes complexes. Dix huit patients (36%) étaient en rémission complète (RC), 24 (48%) en rémission partielle (RP), , 7 (14%) en Maladie stable (SD) 1 Progression (PD). Sur les 18 RC la maladie résiduelle (MRD) était négative (-) dans 10 (20%) et positive (+) dans 8 (16%) cas. Le conditionnement était de type atténué (RIC) sauf 1cas myéloablatif. La GVHD aiguë (aGVHD) chez 26 (52%) dont 18 (36%) de grade 1-2 et huit (16%) grade 3-4 la GVHD chronique (cGVHD) limitée chez 3 (6%) et 15 (30%) extensive.
Survie et progression : Au dernier visite, 26 (52%) vivants et 17 (34%) étaient en RC, neuf (18%) rechute. Les causes de décès etaient la GVHD 8 (16%), neuf infection (18%), une neurotoxicité (G Barré) à 7mois de allo HSCT, un hématome sous dural (post traumatique), deux Richter progressif. Trois cancers secondaires (Mélanome métastatique, Cancer du sein, Carcinome urétéral). La survi médian était 119 mois (102-147), la PFS était de 58 % à 5 ans et OS était de 66% à 5ans. Le pourcentage de aGVHD grade 2-4 était de 40% (28-56) et le pourcentage de aGVHD grade 3-4 était de 16% (28-56) IC 95%, La cGVHD all grade à 5ans était 36% (25-52) et cGVHD modérée et sévère à 5ans était à 30% (20-46) IC95%. L’incidence cumulée de rechute (CIR) était de 10% (4-23) à 3ans et 12% à 5ans (6-26) et la mortalité liée à la greffe était 30% à 3ans et à 5ans.
Conclusion
Dans notre étude seul six patients (12%) ont bénéficier de nouvelle thérapie et étaient tous en RC, MRD + en pré greffe, un seul avait une MDR -. En post greffe tous les six étaient en RC MRD -, un seul décès due à sa deuxième allo HSCT après rejet du premier greffon, les autres sont vivant et en RC. Le taux faible de patient ayant bénéficier les nouvelles TC, il serait difficile de tirer une conclusion définitive sur la question. Nous continuerons l’étude afin d’avoir une cohorte plus représentative.


Conclusion
Oui
Bibliographie
1. Monnereau A, Remontet L, Maynadié M, et al. Estimation nationale de l'incidence des cancers en France entre 1980 et 2012. Partie 2 – Hémopathies malignes. Saint- Maurice (Fra): Institut de veille sanitaire; 201388.
2. Mattsson J, Uzunel M, Remberger M, Ljungman P, Kimby E, Ringden O, Zetterquist H. Minimal residual disease is common after allogeneic stem cell transplantation in patients with B cell chronic lymphocytic leukemia and may be controlled by graftversus- host disease. Leukemia 2000 ; 14 : 247-54.
3. Esteve J, Villamor N, Colomer D, Montserrat E. Different clinical value of minimal residual disease after autologous and allogeneic stem cell transplantation for chronic lymphocytic leukemia. Blood 2002 ; 99 : 1873-4.
4. Michallet M, Michallet AS, Le QH, Bandini G, Rowlings PA, Deeg HJ, Garthon G, Montserrat E, Nicolini F, Rozman C, Gratwohl A, Niederwieser D, Bredeson C, Horowitz D. Conventional HLA-identical sibling bone marrow transpantation is able to cure chronic lymphocytic leukemia. Blood 2003 ; 102 : 474a.
 

Introduction: L’injection de lymphocytes du donneur (DLI) est une thérapeutique utilisée pour optimiser l’effet graft versus leukemia (GVL) afin de prévenir les rechutes après allogreffe. Cette étude a recensé 60 patients ayant reçu des DLI après allogreffe entre 2009 et 2022 au Centre Hospitalier Universitaire de Limoges, dans le but d’évaluer nos pratiques et les résultats sur les patients.
Méthodes: Le critère principal était d’évaluer la survie globale des patients et la survie selon l'indication des DLI, 4 groupe de patients ont été définis : prophylactique, pré-emptive (maladie résiduelle positive et chimérisme mixte) et curative. Les critères secondaires visaient à apprécier l’incidence cumulée des rechutes à partir de l’allogreffe, la survie sans rechute et l’incidence cumulée des réactions du greffon contre l'hôte (GVH) aiguës et chroniques. Les analyses statistiques ont été  réalisées par un test de Kaplan-Méier.
Résultats: La survie globale était évaluée à 77% à 5 ans avec une meilleure survie pour les patients des groupes « chimérisme mixte » et « prophylactique ». La survie sans rechute à partir des DLI était évaluée à 70% à 5 ans alors que l’incidence cumulée des rechutes à partir de l’allogreffe était de 48% à 5 ans. La moitié des patients développait une GVH aiguë et 30% une GVH chronique.
Conclusion: Les DLI semblent être une thérapeutique efficace pour prévenir les rechutes mais la MRD positive avant l’injection des DLI reste un facteur de très mauvais pronostic. L’association à une autre thérapeutique associée aux DLI doit être privilégiée dès que possible. L’incidence de GVH reste néanmoins élevée mais avec une mortalité induite par le traitement faible.

Survie globale à partir de la 1ère injection des DLI en fonction des sous-groupes.

Conclusion
Oui

Patients receiving allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (alloHSCT) may experience prolonged shedding of Influenza and other respiratory viruses. Neuraminidase inhibitors (NA) monotherapy might prove inadequate to entirely suppress the replication of the influenza virus, potentially fostering drug-resistant mutations.
We present the case of a 37-year-old woman with a complex medical history of follicular lymphoma, who received several lines of treatment including chemotherapy, CAR-T cells and alloHSCT in October 2022. In January 2023, she presented a coinfection with influenza A H3N2 and human coronavirus OC43 (HCoV-OC43). Her clinical course was marked by persistent symptoms including cough and dyspnea. Diagnostic tests including CT scans and pulmonary function tests indicated bronchopneumonia and obstructive respiratory disorder. Successive oseltamivir and zanamivir 10-day monotherapies failed to control both infections, with positive results persisting for over 110 days each. This led to the emergence of highly resistant oseltamivir strains due to neuraminidase mutations (E119V and R292K) followed by a deletion (del245-248), while maintaining sensitivity to zanamivir. The intra-host viral diversity data showed that the treatments impacted viral diversity of influenza virus, but not of HCoV-OC43.
Considering the patient's underlying hematological condition and the potential impact of prolonged viral shedding on pulmonary function, eradicating the influenza virus was necessary.
A 10-day regimen combining zanamivir and baloxavir-marboxil effectively controlled Influenza replication and was also associated with HCoV-OC43 clearance, finally resulting in comprehensive respiratory recovery.
These observations underscore the importance of further investigating combination treatments as the primary approach to achieve Influenza eradication in immunocompromised patients and thus the need to consider specific approval of baloxavir-marboxil for use in this patient population.
Conclusion
Oui

Introduction :
Les astrovirus sont des virus à ARN, d’origine communautaire, ayant une très forte séroprévalence dans la population pédiatrique et responsables d’infections digestives, respiratoires et d’encéphalites chez les patients immunodéprimés. ,
Nous rapportons le cas d’un patient allogreffé de moelle, présentant des diarrhées faisant suspecter une réaction du greffon contre l’hôte aigue (GVHa) finalement infirmée par les examens réalisés et la mise en évidence d’un astrovirus dans les selles.
Matériel & Méthode :
La mise en évidence de l’astrovirus dans les selles se fait par un panel FilmArray gastro-intestinal. La métagénomique clinique (MgC) permet d’obtenir une séquence du virus.
Il s’agit d’un patient de 36 ans ayant reçu une allogreffe de moelle osseuse pour une drépanocytose après conditionnement réduit (TBI 2 Gy, Thiotepa, Fludarabine, Endoxan, sérum anti-lymphocytaire) et prophylaxie de la GvH par Cellcept, Sirolimus et Endoxan post greffe. Il est sorti d’aplasie à J+21.
Le chimérisme à J+30 était 100% donneur. Le phénotypage T CD4 et CD8 à J100 était à 75/mm3 et 511/mm3, respectivement.
Résultats :
A 3 mois post-greffe, suite à son retour à domicile, il présente un tableau digestif associant nausées/vomissements puis diarrhées profuses (1000 ml par jour). Le scanner abdomino-pelvien était normal. Les prélèvements microbiologiques de 1ère intention (coprocultures, clostridium difficile, parasitologie et virologie des selles comprenant adénovirus, rotavirus et norovirus 1 et 2) étaient négatives. Les endoscopies hautes et basses étaient macroscopiquement normales. Dans l’hypothèse d’une GVHa digestive grade III, une corticothérapie à 2mg/kg a été débutée sans amélioration clinique à J+7. L’histologie des biopsies digestives ne retrouvaient pas d’argument pour une GVHa. La recherche microbiologique par Film Array sur selles a mis en évidence un astrovirus. Le MgC a permis d’identifier un Astrovirus Humain de type 3. L’étude des prélèvements de selle réalisées avant l’épisode aigue n’a pas permis de mettre en évidence l’astrovirus, en faveur d’une contamination à domicile. La corticothérapie a donc été arrêtée et l’évolution clinique a été rapidement favorable.
Discussion :
L’astrovirus est un virus de transmission orofécale, pathogène en cas d’immunodépression. Il doit être particulièrement recherché en cas de contact avec une population pédiatrique porteuse asymptomatique. Contrairement à d’autres virus responsables de gastroentérites, il entraine peu d’anomalies histologiques iii. Le panel FilmArray à la recherche d’agents de gastro-entérites communautaires peut donc présenter un intérêt dans ce contexte. Cependant, il ne détecte que les Astrovirus dits classiques rendant parfois nécessaire l’utilisation du MgC.
Conclusion :
Devant un tableau digestif bas dans les 3 premiers mois d’une allogreffe de moelle, en l’absence d’argument pour une GVH aigue digestive et en cas de négativité des prélèvements microbiologiques standards, l’utilisation du Film Array sur selles à la recherche de virus come l’astrovirus doit être réalisée. Il s’agit d’un diagnostic différentiel rare à évoquer en cas de retour à domicile favorisant la réinfection virale. L’isolement contact du patient et le dépistage des patients contacts symptomatiques doit également être mise en place.
Conclusion
Non
Bibliographie

i Johnson et al., « Astrovirus Pathogenesis ». 
ii Cortez et al., « Persistent Infections with Diverse Co-Circulating Astroviruses in Pediatric Oncology Patients, Memphis, Tennessee, USA ». 
iii Johnson et al., « Astrovirus Pathogenesis ». 
 

Tableau 1: caractéristiques initiales des patients

Figure 1: Survie globale estimée à 3 ans des patients greffés et non greffés (1A), et survie sans évènement à 3 ans des patients greffés et non greffés (1B).

Conclusion
Oui
Bibliographie
1.            Elmariah H, Garrett ME, De Castro LM, et al. Factors associated with survival in a contemporary adult sickle cell disease cohort. Am J Hematol. 2014;89(5):530-535. doi:10.1002/ajh.23683
2.            Gladwin MT, Barst RJ, Gibbs JSR, et al. Risk Factors for Death in 632 Patients with Sickle Cell Disease in the United States and United Kingdom. PLoS One. 2014;9(7):e99489. doi:10.1371/journal.pone.0099489
3.            Damy T, Bodez D, Habibi A, et al. Haematological determinants of cardiac involvement in adults with sickle cell disease. Eur Heart J. 2016;37(14):1158-1167. doi:10.1093/eurheartj/ehv555
4.            Zimbarra Cabrita I, Mohammed A, Layton M, et al. The association between tricuspid regurgitation velocity and 5-year survival in a North West London population of patients with sickle cell disease in the United Kingdom. British Journal of Haematology. 2013;162(3):400-408. doi:10.1111/bjh.12391
5.            Karacaoglu PK, Asma S, Korur A, et al. East Mediterranean region sickle cell disease mortality trial: retrospective multicenter cohort analysis of 735 patients. Ann Hematol. 2016;95(6):993-1000. doi:10.1007/s00277-016-2655-5
6.            Schimmel M, van Beers EJ, van Tuijn CFJ, et al. N-terminal pro-B-type natriuretic peptide, tricuspid jet flow velocity, and death in adults with sickle cell disease. American Journal of Hematology. 2015;90(4):E75-E76. doi:10.1002/ajh.23944
7.            Fitzhugh C, Lauder N, Jonassaint J, et al. Cardiopulmonary Complications Leading to Premature Deaths in Adult Patients with Sickle Cell Disease. Am J Hematol. 2010;85(1):10.1002/ajh.21569. doi:10.1002/ajh.21569
8.            Bernaudin F, Dalle JH, Bories D, et al. Long-term event-free survival, chimerism and fertility outcomes in 234 patients with sickle-cell anemia younger than 30 years after myeloablative conditioning and matched-sibling transplantation in France. Haematologica. 2020;105(1):91-101. doi:10.3324/haematol.2018.213207
9.            Hsieh MM, Fitzhugh CD, Weitzel RP, et al. Nonmyeloablative HLA-Matched Sibling Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation for Severe Sickle Cell Phenotype. JAMA. 2014;312(1):48-56. doi:10.1001/jama.2014.7192
10.         De La Fuente J, Dhedin N, Koyama T, et al. Haploidentical Bone Marrow Transplantation with Post-Transplantation Cyclophosphamide Plus Thiotepa Improves Donor Engraftment in Patients with Sickle Cell Anemia: Results of an International Learning Collaborative. Biology of Blood and Marrow Transplantation. 2019;25(6):1197-1209. doi:10.1016/j.bbmt.2018.11.027

Introduction/objectif 
L’évaluation de la richesse en cellules CD34+ des greffons de cellules souches hématopoïétiques (CSH) destinés à la transplantation est une recommandation selon la norme D8.1.3.2. de l’édition 8.1 des “FACT-JACIE International Standards for Hematopoietic Cellular Therapy Product Collection, Processing, and Administration”. Au niveau du Centre National de Transfusion Sanguine de Tunis (CNTS), nous réalisons également la numération des cellules mononuclées (CMN). Dans ce travail, nous nous proposons d’étudier la corrélation entre les CMN et les cellules CD34+ énumérées dans les greffons de CSH allogéniques médullaires. 
Matériel & méthode
Il s’agit d’une étude rétrospective menée entre janvier 2022 et décembre 2022 sur des greffons médullaires prélevés au Centre National de Greffe de Moelle Osseuse de Tunis (CNGMO) et préparés au CNTS. La numération des CMN a été effectuée sur un microscope optique à l’aide d’une cellule de Malassez après dilution au 1/20ème dans le liquide Lazarus. La numération des cellules CD34+ a été réalisée par la technique en double plateforme : la numération formule sanguine a été réalisée sur le compteur de globules SFRI H18Light et la numération des cellules CD34+ par cytométrie en flux sur le cytomètre BD FACS CALTO II. La collecte des données a été faite sur le logiciel Microsoft Office EXCEL® et l’étude de la corrélation a été réalisée par le logiciel MedCalc®.      
Résultats
Notre étude a été réalisée sur 77 greffons allogéniques de CSH médullaires. Les donneurs avaient un âge moyen de 25,57 ans [2 ; 55], un poids moyen de 62 kg [6 ; 119] avec un sex-ratio égal à 1,14. La prise d’un facteur humain recombinant de stimulation des colonies des granulocytes (G-CSF) a été notée chez 24 donneurs avec une dose moyenne de 10,9 µg/kg/j. Le poids moyen des receveurs est de 44 kg [3,5 ; 103]. La moyenne des CMN énumérées dans les greffons est de 3,47 [0,88 ; 14,8] *10^8/kg de poids du receveur et celle des cellules CD34+ est de 4,08 [0,62 ; 21,52] *10^6/kg de poids du receveur. Le coefficient de corrélation entre notre paire de variables est de 0,5964 avec un p < 0.0001. L’intervalle de confiance à 95% pour p s’étend de 0,4298 à 0,7237.
Discussion
La greffe allogénique des CSH est une thérapeutique curative pour nombreuses indications principalement les hémopathies malignes, les aplasies médullaires, les désordres du système immunitaire et les hémoglobinopathies.La richesse des greffons en cellules CD34+ a un impact direct sur l’issue de la greffe. La valeur de 0,5964 du coefficient de corrélation indique l'existence d’une relation linéaire positive entre la numération des CMN et celle des cellules CD34+.La valeur de p< 0,0001 indique que la relation est statistiquement significative.Ces résultats montrent que la numération des CMN peut servir comme indicateur de la richesse des greffons. Par ailleurs, c’est un outil permettant une remise des résultats rapide, relativement à la cytométrie en flux, particulièrement utile pour fournir des renseignements au médecin préleveur au bloc opératoire. De plus, c’est un paramètre adapté aux situations limitées en ressources humaines et matérielles.
Conclusion
Notre étude montre que la numération des CMN peut être considérée comme un indicateur de la richesse des greffons médullaires en complément de la numération des cellules CD34+ surtout au cours du prélèvement durant lequel le donneur est sous anesthésie générale.
Conclusion
Oui

Introduction/objectif
La greffe allogénique de cellules souches hématopoïétiques (CSH) fait partie de l’arsenal thérapeutique dédié à la prise en charge d’un certain nombre d’hémopathies malignes et non malignes. Un engagement dans une démarche de management intégré qualité-risque est indispensable pour maitriser cette procédure complexe. En 2015, la SFGM-TC a proposé un guide recensant une liste d’indicateurs permettant d’évaluer les pratiques professionnelles dans l’ensemble des étapes du processus de la greffe de CSH. Nous nous proposons d’étudier les indicateurs qualité des greffons médullaires allogéniques préparés au Centre National de Transfusion Sanguine de Tunis (CNTS).
Matériel et méthode
Il s’agit d’une étude rétrospective menée entre janvier et décembre 2022. Les greffons médullaires ont été prélevés au Centre National de Greffe de Moelle Osseuse de Tunis et préparés au CNTS. Les indicateurs qualités auxquels nous nous sommes intéressées ont été inspirés du “Guide des indicateurs qualité proposés dans le processus de greffe de cellules souches hématopoïétiques” proposé par la SFGM-TC et basé sur les standards JACIE. La collecte des données ainsi que le calcul des différents résultats ont été réalisés sur le logiciel Microsoft Office EXCEL®. 
Résultats
Notre étude a inclus 35 patients d’un âge moyen de 27 ans [6 ; 50], un poids moyen de 63 kg [20;103] et un sex-ratio de 1,8. Pour les donneurs, l’âge moyen était de 28 ans [5 ;55], le poids moyen de 69 kg [18;119] et le sex-ratio de 1,1. La richesse moyenne des greffons en cellules CD34+ était de 2×106/kg poids receveur. Le rendement moyen en cellules mononucléées (CMN) était de 93,11% [58 ; 100] et la viabilité moyenne des cellules nucléées totales (CNT) après manipulation était de 94,61 % (σ=3,37). A j+28, un taux de PNN>500 éléments/mm3 et de plaquettes >20.000/mm3 a été noté chez 94% des receveurs et 34% d’entre eux avaient un taux d'hémoglobine >10 g/dL.Les résultats des indicateurs cliniques étudiés sont présentés dans le tableau 1. Par ailleurs, les contrôles bactériologiques après manipulation se sont tous avérés négatifs. 
Discussion
En l’absence de cible standardisée, le suivi des indicateurs qualité joue un rôle crucial dans la garantie de la sécurité et de l'efficacité de l’issue de l'allogreffe de CSH. Le CNTS essaye, avec les moyens disponibles, de s’aligner aux recommandations internationales. Dans ce travail, la richesse des greffons a été évaluée principalement par la numération des CMN et des cellules CD34+ viables. Les résultats de ces indicateurs de transformation témoignent  de la maitrise des procédures de manipulation et influencent positivement les résultats des indicateurs cliniques particulièrement les délais de la reconstitution hématopoïétique. Avec une activité relativement constante, le suivi de ces indicateurs servira à la détermination d’une valeur seuil en accord avec les pratiques réelles du centre permettant une évaluation et une amélioration continuelle de la procédure.
Conclusion
Les résultats du suivi des indicateurs cliniques et de transformation des greffons de CSH médullaires allogéniques témoignent de la robustesse de la démarche qualité à laquelle le CNTS s’est engagé pour améliorer le taux de succès d’une telle thérapeutique complexe et constituent une piste pour un alignement plus étroit sur les recommandations internationales.

Tableau des résultats des indicateurs cliniques

Conclusion
Oui

Introduction/Objectif
Le sarcome myéloïde est une entité réputée rare, mais probablement sous-estimée. En effet, dans une étude réalisant un TEP scanner systématique à toute nouvelle LAM, son incidence atteignait 11% (mettre la réf). Son traitement associe chimiothérapie voire radiothérapie, et l’allogreffe en première ligne est controversée. L’objectif principal de notre étude est de décrire les résultats de l’allogreffe chez des patients porteurs de sarcome myéloïde sur la base des données du registre de la SFGM-TC. Ce travail avait été réalisé en 2008 (Chevallier et al, JCO). Nous actualisons et complétons ici les données de cette cohorte .

Matériel & Méthode
Ce travail est une étude rétrospective utilisant les données du registre de la SFGM-TC d’où nous avons extrait tous les patients pour qui « sarcome myéloïde » était renseigné dans le diagnostic de l’hémopathie ayant motivé l’allogreffe entre 2005 et 2021. Les analyses statistiques ont été réalisées avec le programme R.

Résultats
Nous avons inclus 78 patients issus de 29 centres francophones avec un âgé médian de 44 ans dont 9 patients de moins de 15 ans. . La majorité des patients sont des hommes (73%). Vingt-et-un patients avaient un sarcome myéloïde isolé avant la greffe et 13 patients avaient un sarcome associé à une LAM (44 données manquantes). Les analyses cytogénétiques et de biologie moléculaire étaient disponibles pour 50 patients : 55% d’entre eux avait un pronostic intermédiaire ou adverse selon ELN 2022. Le délai médian entre le diagnostic et la greffe était de 168 jours et 52% des patients étaient greffés en RC1 contre 19% greffé en situation de maladie progressive. Un conditionnement non-myéloablatif a été proposé à 41% des patients.

Avec un suivi médian de 20 mois, la survie globale à 1 an et 5 ans étaient respectivement de 77% et 57%. Les données de survie montrent une médiane de survie globale et de survie sans maladie non atteintes. La survie sans progression est de 65% à 1 an et de 58% à 5 ans.

Concernant les complications post allogreffes, 54% des patients n’ont pas présenté de GVH aigue. Vingt-neuf pourcents des patients ont présenté une GVH aigue de Grade II à IV. Vingt-huit patients ont présenté une GVH chronique, dont 21 limitées. La GRFS à 1 an est de 33%, et l’estimation à 5 ans est de 25%.
La mortalité liée à la greffe est à 11% à 1 an. Le facteur pronostic majeur de survie globale est la réalisation de la greffe en première rémission complète.

Discussion
Ce travail décrit les résultats de l’allogreffe dans une situation particulière où la leucémie aigue myéloïde revêt des proprité d’infiltration du tissu extra-hématopoïétique. Les résultats montrent des taux de survie et de rechute qui sont comparables à ceux de l’allogreffe des cohortes de patient avec LAM où le caractère "sarcome" n’est pas mentionné. Ceci est un argument indirect pour un effet GVL de l'allogreffe en dehors du tissu hématopoïétique. 

Conclusion
En conclusion, ce travail permet d’actualiser les donne?es de l’allogreffe chez les patients porteurs de sarcome mye?loi?de. Les me?dianes de survie globale et de survie sans progression ne sont pas atteintes dans notre e?tude, avec une toxicité liée à la greffe acceptable. Compte-tenu des donne?es disponible de la litte?rature, il semble raisonnable de proposer l’allogreffe comme immunothe?rapie de consolidation chez les patients porteurs de LAM avec sarcome mye?loi?de en premie?re re?mission comple?te.
 

Caractéristiques de la cohorte selon le statut vital à 1 an

La survie globale des patients allogreffés est estimée à 57% à 5 ans.

La survie sans progression des patients est estimée à 58% à 5 ans.

Conclusion
Non

Introduction Objectif
Analyser les recrutements de donneurs non apparentés en France de 2018 à 2023.
Matériel & Méthode
Analyse descriptive de données de la base de données Syrenad.
Résultats Tableau 1 Tableau 2

Les résultats de l’activité à fin août 2023 sont résumés dans le tableau ci-dessous.
Tableau 3

Conclusion

Tableau 1

Tableau 2

Tableau 3

Conclusion
Non

Malgré les multiples progrès thérapeutiques réalisés dans les allogreffes de CSH, la GvH aiguë reste un problème majeur. Plusieurs études ont montré des altérations du microbiote intestinal au cours de la GVH aiguë. L’impact d’une antibiothérapie sur le microbiote intestinal a, lui aussi, déjà été analysé mais son rôle dans la survenue de la GVH aiguë reste encore à l’étude, avec des effets variables selon le spectre antimicrobien considéré et des résultats discordants. Nous avons souhaité évaluer cette question dans une cohorte unicentrique, homogène, chez des patients allogreffés pour des LAM.
Pour cette étude, nous avons recueilli de façon rétrospective les données cliniques des patients adultes allogreffés au CHU de Bordeaux de 2012 à 2021. L’objectif primaire était d’évalué l’impact de l’antibiothérapie (4 catégories : Céphalosporines ou CG, Tazocilline ou TAZO, Carbapénèmes ou CBP et multiples antibiothérapies ou MULTATB) sur l’incidence de GVH aiguë. Les objectifs secondaires ont porté sur l’impact des antibiotiques (ATB) sur la sévérité de la GvH aiguë, la mortalité liée à la GVH, les GVH cortico-résistantes, les GvH digestives, en analysant également la durée et le délai d’introduction de l’antibiothérapie.
Au total, nous avons inclus 404 patients, dont la survie, à un an, était de 74%, la survie sans progression de 64%, l’incidence de rechute de 14% et l’incidence de NRM de 10%. L’incidence cumulé de GvH aiguë à J180 était de 48% pour les grade II à IV et 23% pour les grades III-IV.
En analyse univariée, l’incidence cumulée de GvH aiguë (grade II à IV) à J180 était significativement plus importante chez les patients recevant des Pénèmes, une antibiothérapie multiple (CBP : 48%, MULTATB : 50%, TAZO : 32%, CG : 34%, p < 0,005), un nombre important d’antibiotiques (49% avec 2 ATB, 47% avec 3 ATB et 47% avec 4 ATB et plus, p = 0,002) et une antibiothérapie tardive (37% avant J0 contre 50% après J0, p = 0,2). Les patients recevant une antibiothérapie par CG ont une diminution non significative de l’incidence cumulée de GVH aiguë sévère (CG : 9.3%, TAZO : 14%, CBP : 18%, MULTATB : 15%, p = 0.2) et du taux de GvH cortico-résistante (38% vs 28%). La sévérité de la GvH digestive est significativement plus importante en cas d’antibiothérapie par TAZO (5,3% de patients avec une GvH digestive tout stade confondu vs 14% avec GvH digestive sévère) ou une MULTATB (37% de patients avec une GvH digestive tout stade confondu vs 46% avec GvH digestive sévère) alors qu’elle est significativement moins importante avec les CG.  
En analyse multivariée, les CBP et MULTATB sont associées à une augmentation non statistiquement significative de l’incidence de GVH aiguë (grade II à IV) (CBP : HR = 1.64, IC = 0.98 ; 2.73, p = 0,06 et MULTATB : HR = 1.49, IC = 0.96 ; 2.31, p = 0,07) mais augmentent significativement le risque de GVH aiguë sévère (III-IV). E revanche, l’incidence de GvH aiguë est significativement augmentée chez les patients recevant deux antibiotiques (HR = 1.59, IC = 1.03 ; 2.47, p = 0,03).
Cette étude souligne l’impact délétère des antibiothérapies sur l’incidence de GVH aiguë, dont les formes digestives et sévères. Des protocoles d’antibiothérapies adaptées et raisonnées doivent être définis en fonction de l’écologie bactérienne locale. La correction des perturbations du microbiote consécutives à la greffe et aux antibiotiques par la transplantation de microbiote fécal apparait comme une option valide pour prévenir ou traiter la GVH aiguë.
Conclusion
Oui

INTRODUCTION: 
Conclusion
Non

Introduction
Dans le cadre de ses missions d'évaluation des résultats post-greffe, l'Agence de la biomédecine a décidé de monitorer en continu, à partir du 1er janvier 2022, l'évolution de la performance à court terme des équipes d’allogreffes, représentée par le taux d’échec de greffe, avec la méthode des sommes cumulées (CUSUM). Cette étude s'inscrit dans une démarche d'évaluation des résultats post-greffe précoces (J100), conforme aux standards JACIE, donnant aux équipes les moyens de s'autoévaluer en continu et de se situer par rapport au standard de l'équipe elle-même ou au standard national.

Matériel et méthodes
La méthode du CUSUM est destinée à comparer les performances d’une équipe dans une période récente (dite d’analyse) aux performances de l’équipe ou de la France pendant une période plus ancienne (dite de référence).
Elle permet de réaliser graphiquement un test pour choisir entre deux hypothèses :
- l’hypothèse nulle, dans laquelle les performances de l’équipe, en période d’analyse, sont identiques à celles de la France (si l’on souhaite comparer l’équipe à une référence nationale) ou à celles de l’équipe (si l’on souhaite comparer l’équipe à elle-même), pendant la période de référence.
- l’hypothèse alternative, dans laquelle les performances de l’équipe, en période d’analyse, sont soit détériorées, soit améliorées, par rapport à celles de la France ou de l’équipe pendant la période de référence.
On distingue le CUSUM de détérioration, ou d’amélioration. Le score du CUSUM est calculé et cumulé chronologiquement pour chaque greffe de la période d’analyse. Pour un CUSUM de détérioration une ascension de la courbe correspond à un échec, et une diminution de la courbe à un succès. Et inversement pour un CUSUM d’amélioration.
Le CUSUM peut être ajusté, la valeur de l'augmentation ou de la diminution de la courbe dépend alors des caractéristiques des donneurs, des receveurs et des conditions de la greffe, le poids de chaque facteur pronostique étant déterminé par une analyse de régression logistique multivariée du taux d’échec sur la période de référence.
Un seuil d’alerte est calculé sur les données de la période de référence, à partir notamment de l’odds ratio choisi pour retenir l’hypothèse alternative et du nombre de greffes réalisées par l’équipe.
Si la courbe atteint le seuil d'alerte, le taux d'échec observé en période d’analyse est significativement supérieur (CUSUM de détérioration) ou inférieur (CUSUM d’amélioration) au taux d'échec en période de référence.
La méthodologie de calcul de l’indicateur CUSUM en pédiatrie a été déterminée avec le groupe de travail :
Greffes incluses : 1ères allogreffes 2018-2022 pour LAM, LAL, Hodgkin, LNH, MDS, SMP, Aplasie, Inborn error, hémoglobinopathie, patients de moins de 18 ans.
Définition de l’échec de greffe : décès avant J100 (de TRM ou de rechute), 2ème allogreffe avant J100, absence de prise de greffe avant J100, perte précoce du greffon avant J100.
Facteurs d’ajustement : âge, diagnostic, état de la maladie à la greffe pour les LA, type de conditionnement (myéloablatif, non myéloablatif), type de donneur (Géno, MUD, MMUD, haplo), source cellulaire (MO, CSP, USP),
Analyse : Comparaison pour chaque équipe, du taux d’échec de greffe sur la période d’analyse (2022) au taux d’échec de greffe en période de référence (2018-2021).
 
Résultats
Les résultats significatifs seront présentés et interprétés. Ci-dessous un exemple de détérioration et d’amélioration déjà observé parmi les équipes adultes.

CUSUM de détérioration

CUSUM d'amélioration

Conclusion
Oui
Bibliographie
Alexandrine B et al. Continuous monitoring of transplant center performance: different options for different goals. Transplantation (2019), 103(9): 1935-1944.

Mots-clés : allogreffe ; drépanocytose ; pédiatrie
Conclusion
Non

Multiple myeloma (MM) is a hematological malignancy characterized by an abnormal clonal plasma cell proliferation in the bone marrow secreting a monoclonal component. The actual international standard care for eligible patients consists of an intensive induction therapy followed by high-dose melphalan and autologous stem cell transplantation (ASCT).

Our study included two groups of newly diagnosed MM patients who received a first-line treatment consisting of double or triple induction, ASCT, with or without consolidation and maintenance, treated in Lyon (France) and in Oran (Algeria).

The principal aim of this study was to evaluate the long-term outcome after ASCT in these 2 countries with different resources and to evaluate the potential consequences of non-identical access to the same therapeutic arsenal and means of early detection of relapse.

Despite important differences between the 2 countries, we showed a similar Overall Survival (OS) for the total population, and for patients who did not relapse and did not receive any chemotherapy after ASCT. Surprisingly, these latter patients concerned 2/3 of Algerian patients and only 1/3 of French patients, explained by differences regarding the definition of relapse and leading to a probable underestimation in Algeria. To better explore this important observation, we performed survival analysis using the instant ratio, and found a better survival in France between 0-12 months after ASCT, related to a higher non-relapse mortality during this period in Algeria. Furthermore, we showed a better survival in Algeria after 48 months. This last result was enhanced by a significant difference in the time to next treatment (TTNT) between Algeria and France (median TTNT of 72.61 months and 32.77 months, respectively). For relapsing patients, we found a better OS in France for patients who received ≤3 lines of treatment after ASCT, and no difference between French patients who received ≥4 therapeutic lines and Algerian patients receiving 1 or 2 lines.

In conclusion, waiting to re-treat MM patients in Algeria, correlated with delayed TTNT, could argue to the hypothesis of lower healthcare costs and perhaps therapeutic saving when comparing France and Algeria, strengthened by a similar global long-term OS of the 2 groups.
 
Conclusion
Oui

Introduction/objectif

Pour un alignement aux recommandations internationales portant sur l’optimisation de la qualité des greffons, plusieurs systèmes de management de la qualité ont été mis en place dans les différents centres spécialisés dans la collecte et la transplantation des cellules souches hématopoïétiques (CSH). Dans ce travail, nous nous proposons d’étudier les indicateurs qualité des greffons autologues de CSH périphériques (CSHP) préparés au Centre National de Transfusion Sanguine de Tunis (CNTS).

Matériel et méthode

Il s’agit d’une étude rétrospective menée entre janvier et décembre 2022 au CNTS. Les greffons de CSHP sont prélevés sur les systèmes d’aphérèse MCS®ou SpectraOptia® et cryoconservés dans l’azote liquide. La numération des cellules CD34+ a été réalisée par cytométrie en flux en double plateforme. La viabilité des cellules nucléées totales (CNT) a été réalisée par cytométrie en flux suite à un marquage par le 7-AAD. Le choix des indicateurs a été inspiré du « Guide des indicateurs Qualité proposés dans le processus de greffe de cellules souches hématopoïétiques » de la SFGM-TC. La collecte des données ainsi que le calcul des différents résultats ont été réalisés sur le logiciel Microsoft Office EXCEL®. 

Résultats

Au total, 57 greffons de CSHP et 53 patients ont été inclus dans notre étude. L’âge moyen des receveurs est de 51 ans [15 ; 66] et le sex-ratio est de 0,73. Le prélèvement des CSHP a été réalisé sur MCS® (56%) et SpectraOptia® (44%). La reconstitution neutrophile a eu lieu au temps médian de J11 (J7-j15).Plus de 98% des patients ont montré un chiffre de PNN> 500 éléments/mm3 dans les 14 jours post autogreffe. La reconstitution plaquettaire a eu lieu au temps médian de J12 (J6-J20). Un chiffre de plaquettes >20.000/mm3 à J+14 a été noté chez 79% des patients. Le rendement moyen en cellules CD34+ était de 99%(σ=43,14). La viabilité moyenne des CNT avant transformation était de 99,4% (σ=0,39). La viabilité moyenne des CNT après cryoconservation est de 61% (σ=18,41). Les résultats des contrôles bactériologiques après transformation et cryoconservation se sont tous avérés négatifs. 

Discussion

Dans notre étude, 98% des patients ont montré un chiffre de PNN> 500 éléments/mm3 dans les 14 jours post autogreffe. Ce qui s’aligne avec le seuil ≥ 80% proposé dans le guide. Le temps médian de la reconstitution plaquettaire et le pourcentage des patients chez qui un chiffre de plaquettes >20.000/mm3 à J+14 témoignent d’une issue clinique positive. Pour le rendement en cellules CD34+, notre résultat de 99% va largement au-delà de la cible proposée (>70%). Pour la viabilité moyenne des CNT avant transformation et à l’issue de la cryoconservation, on a noté respectivement 99,4% et 61% respectant les seuils proposés dans le guide (90% et 60%). Bien que non décrit dans le guide, nous réalisons un suivi systématique du contrôle du taux de contamination microbienne des greffons avant transformation et cryoconservation et après décongélation. Les résultats négatifs reflètent le respect des conditions d’asepsie durant tout le processus de manipulation.

Conclusion

Malgré les moyens matériels et humains limités, le CNTS s’est engagé dans une approche qualité par indicateurs permettant la maîtrise de la procédure de l’autogreffe de CSHP du prélèvement à la cession des greffons.
Conclusion
Oui

Introduction
aGvHD is a major source of mortality following alloHCT. Fecal microbiotherapy has shown promising results in patients with refractory GI-aGvHD. Here we report clinical outcomes of 111 patients with steroid-refractory (SR) or dependent (SD) GI-aGvHD treated with the pooled allogeneic microbiotherapy MaaT013 in the Early Access Program (EAP) in Europe.
Methods
111 EAP patients (1 pediatric patient, 15 yo) with SR/SD GI-aGvHD (classical n=70, late onset n=12, overlap n=16, hyperacute n=13) were treated with MaaT013. Patients had failed 1 to 6 systemic GvHD treatment lines (median 3; 94/111 ruxolitinib). Most patients had grade III (49%) to IV aGvHD (42%).
3 MaaT013 administrations (enema) were planned every 7 days (median = 3). Each dose contains 30 g of feces in 150 mL inoculum from 4-8 healthy donors. Treatment response was calculated among all treated patients based on aGvHD staging and grading at day 28 (D28).
Results
At D28, GI-ORR was 53%: 39 CR (35%), 15 VGPR (14%), 5 PR (5%). GI-ORR was higher in patients with lower grade aGvHD (100% in grade II, 63% in grade III, 32% in grade IV) and higher in SD vs SR (88% versus 47%). Overall response considering all organs (n=108) was 50% with 34 CR, 16 VGPR and 4 PR.
MaaT013 was well tolerated by the pediatric patient and led to CR of GI and skin (patient had stage 3 skin, stage 4 GI aGvHD) up to 12 months (M12). Liver-GvHD was stable at D28 (stage 2) but improved from M6 without additional therapy.
OS was 56% at M6 and 47% at M12. The median follow-up among surviving patients was 355 days (range, 27-731). OS was significantly higher in patients achieving at least GI-PR at D28 (Responder R; n=59) compared to patients in treatment failure (Non-responder NR; n=52): 74% vs 36% at M6, 67% vs 24% at M12 (p<0.0001 Log-rank test ). Median survival duration in R was 293 days vs 56 days in NR.
Interestingly, in the 38 patients treated with ruxolitinib as 2nd line and MaaT013 as 3rd line GI-ORR was improved being 61% D28, with 58% CR. OS at M6 was 55% and 52% at M12. OS was significantly higher in R compared to NR (81% versus 16% at M6 and 81% versus 8% at M12 for R and NR respectively, p<0.0001 Log-rank test).
MaaT013 displays a good overall safety profile in EAP: 29 safety cases reported in 27 patients, including 18 cases possibly related to MaaT013 by the physician or the company: sepsis in 5 patients, bacteremia in 7, rectal bleeding/anorectal disorder in 3, C. difficile colitis in 1, E. coli osteoarthritis in 1, detection of G. silvicola in stools in 1. No pathogen transmission was reported. In 2 patients, non-pathogenic commensal bacteria isolated following infectious events were detected in the administered MaaT013 batch. Causality could not be formally excluded in these cases.
56 deaths have been reported. Causes of death were GvHD in 23 patients, severe infection in 15, relapse of malignancy in 9, COVID-19 in 5, hemorrhage during surgery in 1, neurological complications post alloHCT in 1, cardiac arrest in 2. No causality link with MaaT013 administration has been identified.
Conclusion
Overall, EAP data showed that MaaT013 was safe and effective for the treatment of SR/SD-GI-aGvHD especially in patients previously treated with ruxolitinib. Interestingly, response of GI- aGvHD correlates with increased overall survival, suggesting a strong favorable benefit-risk profile for MaaT013. A Phase 3 trial is currently ongoing to confirm these results in ruxolitinib-refractory patients (NCT04769895).
 

Baseline characteristics and efficacy results of treated EAP patients

Conclusion
Oui

Background:
Allogenic hematopoietic cell transplantation (alloHCT) is a well-established therapy for various life-threatening hematologic malignancies. The use of alloHCT is constantly increasing, with nearly 20 000 transplantations reported to the EBMT per year. However, this treatment is limited by high morbidity and mortality, mainly related to relapse, infection, graft-versus-host disease (GvHD), and conditioning-related toxicity. Several pioneering studies have shown that the diversity of the gut microbiota of patients not only correlates with the occurrence of medical complications after alloHCT, including GvHD (Jenq et al. 2012, Stein-Thoeringer et al. 2019) and bloodstream infections (Taur et al. 2012), but also with relapse of the underlying disease (Peled et al. 2017). Gut microbiota diversity restoration with fecal microbiotherapy could be an effective treatment to improve patients’ clinical outcomes including overall survival (OS) after alloHCT, through the prevention and resolution of gut microbiota dysbiosis.
MaaT033 is a freeze-dried, full-ecosystem, high-diversity, fecal microbiota medicinal product, formulated as delayed-release capsules and derived from pooled allogenic human fecal material. The PHOEBUS trial is a phase 2b study to evaluate the efficacy of MaaT033 in improving survival of adult alloHCT patients (Clinicaltrials.gov identifier: NCT05762211)

Study design and Methods:
387 subjects aged ≥ 50 years with hematologic malignancies for which an alloHCT is indicated will be randomized 1:1 to receive either MaaT033 (experimental arm) or placebo (control arm) before initiation of the conditioning regimen and after hematopoietic recovery following alloHCT. Stratification of patients will be performed based on disease risk index (low-intermediate versus high-very high) and donor-host compatibility (HLA-identical versus HLA-mismatch). Inclusion criteria include age ≥ 50 years, alloHCT with a reduced-toxicity or reduced-intensity conditioning regimen, neutrophils > 0.5 G/L, and administration of broad-spectrum antibiotics within the last 90 days prior to inclusion. Exclusion criteria comprise non-myeloablative conditioning regimen, conventional myeloablative conditioning regimen, in-vitro T-cell depletion, alloHCT with cord blood cells, alloHCT from an unrelated donor with ≥ 3/10 HLA-mismatches, use of alemtuzumab, vedolizumab or abatacept for GvHD prophylaxis, history of chronic digestive disease.
The primary endpoint is to evaluate OS at 12 months after randomization. Secondary endpoints will include evaluation of the safety of MaaT033, GvHD-free survival, cumulative incidence of acute GvHD and chronic GvHD, non-relapse mortality, relapse-free survival, GvHD-free, relapse-free survival, the proportion of patients with severe infections, gut microbiota composition, and quality of life.
Exploratory endpoints will describe the impact of MaaT013 on immune recovery, the nutritional status of the patients, and resource utilization.
Patients will receive MaaT033 or placebo (3 capsules per day) for 1 week before the start of the conditioning regimen. Experimental treatment (3 capsules per day) will be resumed at neutrophil recovery and pursued up to 90 days after alloHCT. Patients will be followed monthly up to 6 months post alloHCT and then every 3 months up to 12 months.
The study has already been approved in France and Germany; expansion to other countries is planned for 2024. Study start is expected in September 2023.

PHOEBUS trial : Study Flowchart

Conclusion
Oui

Introduction : Le VOLUVEN© (VOL) a été retiré du marché en octobre 2022. Il s’agit d’un hydroxyéthylamidon essentiel utilisé dans les procédés de congélation-décongélation de cellules souches hématopoïétiques (CSH). Ces procédés sont validés et autorisés dans notre laboratoire pour les cellules de sang périphérique (CSP), la moelle osseuse (MO) et les sangs de cordon (SC). Le but de cette étude a été de valider un soluté de substitution dans un contexte urgent sur des prélèvements précieux dans les plus brefs délais afin de soumettre rapidement une modification substantielle aux autorités compétentes.
Matériel et méthode : La validation a été conduite de novembre 2022 à mai 2023. Le choix du soluté de remplacement a été fait sur des critères médico-économique parmi : l’albumine, le plasma autologue, le PLASMION©, le SOL.FIS 2000©, le Ringer-lactate, le NaCl et le PLASMA-LYTE© (PLM). La première étape a été de choisir une source cellulaire éligible à la validation qui soit représentative de notre pratique clinique. La première étape de validation fut sur la congélation seule, puis sur l’ensemble congélation/décongélation. Les critères d’acceptation suivaient les spécifications usuelles du laboratoire : viabilité cellulaire, numération de CD34+/kg et rendement CD34+. Une étude de stabilité à température ambiante sur 6 heures après transformation a été réalisée pour chaque produit.  
Résultat : Le PLM et le NaCl ont été retenus comme soluté de remplacement sur des critères de composition, osmolarité, pH, risque de rupture d’approvisionnement, prix et utilisation dans la littérature. Nous avons écarté de notre analyse les anneaux d’aphérèse, les cryotubes, les poches de MO et les SC, les causes pouvant être la pauvreté cellulaire, la représentativité faible sur l’activité de décongélation annuelle et le manque d’accessibilité. La décongélation a été validée à partir de poches de CSP cryoconservées (123.8x10⁶ CD34+ en moyenne) provenant d’aphérèse de patients décédés ou ayant perdu l’indication à la greffe (n=6). La comparaison n’a montré aucune différence significative, en revanche, la stabilité sur 6 heures s’est avérée meilleure avec le PLM. Pour l’évaluation du procédé entier congélation-décongélation, nous avons attendu d’avoir au moins 3 recueils frais non utilisables en clinique (195.3x10⁶ CD34+ en moyenne). L’ensemble des critères étudiés à chaqcune des étapes est revenu conforme. 
Discussion et Conclusion : Face aux contraintes de temps et de source cellulaire, nous avons tout de même pu démontrer la capacité du PLM à répondre aux critères d’acceptation et à remplacer le VOL. Le dossier de demande de modification substantielle de procédé a été déposé auprès de l’ANSM en août 2023. Néanmoins, cette technique n’a été validée que sur la source la plus fréquente de CSH et nous vérifierons en temps réel si elle est transposable aux autres matrices (MO et CS). Les situations de ruptures d’approvisionnement sont de plus en plus fréquentes depuis les crises mondiales récentes et mettent les laboratoires de Thérapie Cellulaire en difficulté, devant remettre en question constamment leurs procédés. 
Conclusion
Oui

Introduction/Objectif: A Toulouse, entre le 01 janvier 2022 et le 23 août 2023, le service d’aphérèse et le laboratoire de thérapie cellulaire ont été sollicités dans la prise en charge de greffons de 58 patients, atteints de myélome multiple, inclus dans l’étude MIDAS. Les objectifs de ce travail sont de comparer la qualité des produits issus des patients MIDAS vs non inclus, et d’en évaluer les impacts sur l’activité des deux services.
Matériel & Méthode: Des échantillons sont prélevés sur le produit d’aphérèse et après transformation (déplaquettisation si besoin, réduction de volume, ou dilution) pour estimer l’efficacité de la transformation. Une concentration cible en GB inférieure à 200G/L est attendue pour les poches congelées.
Sur demande du clinicien, certaines poches sont décongelées puis poolées pour constituer le greffon infusé au patient. Un échantillon après décongélation est réalisé avec des analyses de numération, viabilité et immunophénotypage, et des calculs de rendement sont réalisés.
Résultats: Au total, 54 patients MIDAS et 39 patients non MIDAS ont été inclus dans les analyses, respectivement 127 cytaphérèses/30 décongélations et 74 cytaphérèses/47 décongelations.
Les contrôles de qualité des produits des 54 patients MIDAS ont été comparés à ceux des produits des 39 patients non MIDAS pendant la même période. La qualité des produits n’a été analysée que sur la première cytaphérèse.  Pour celle-ci, 45% des patients non MIDAS ont bénéficié de Plerixafor, vs 40% pour les patients MIDAS. Aucune différence significative n’a été détectée concernant la richesse en CD34+ et le taux de plaquettes sur ces produits (2,9.10*6/kg vs 2,4*6/kg et 624G vs 631G en moyenne). En revanche, une différence significative est observée sur la richesse en GB et le % de granuleux: en moyenne 66G de leucocytes et 28,6% de granuleux pour les patients Non MIDAS vs 55G de leucocytes et 18,9% de granuleux pour les patients MIDAS.
A la décongélation, la viabilité est meilleure pour les greffons des patients MIDAS (73% vs 67% avec une différence significative). Concernant les rendements en CD34+, bien qu’ils apparaissent meilleurs pour les patients MIDAS (77% vs 75%) leur différence n’est pas significative. La richesse des greffons ainsi que la sortie d’aplasie des patients sont équivalentes (2,4.10*6/kg vs 2,3.10*6/kg et 10 jours en moyenne).
Au niveau de l’impact sur l’activité des services, le nombre de cytaphérèse est en moyenne plus important pour les patients MIDAS : 2,2 vs 1,9, avec un nombre de série plus important. Côté laboratoire de thérapie cellulaire, le nombre de poches congelées par cytaphérèse est similaire, avec une moyenne respectivement de 3,5 pour les patients Non MIDAS vs 3,3 pour les patients MIDAS.
Enfin, le laboratoire de thérapie cellulaire a congelé 419 poches pour des patients MIDAS à ce jour dont 126 (30%) ont été décongelées et 86 (21%) sont toujours en stock pour les patients du bras A (dont les produits congelés ne sont pas prévus à la décongélation dans le protocole).
Discussion/conclusion: La qualité des produits issus de patients inclus dans le protocole MIDAS, à l’aphérèse et à la décongélation, n’apparait pas dégradée par rapport aux produits issus des autres patients traités pour un myélome multiple. Toutefois, le nombre de cytaphérèse par patient et l’absence de déstockage des poches pour ces patients sont impactant et nécessitent une attention particulière pour les services d’aphérèse et de thérapie cellulaire.
Conclusion
Non

La greffe de cellules souches hématopoïétiques (HSCT) est un traitement curatif de choix de la plupart des hémopathies malignes. Néanmoins, dans les phases suivant la greffe, le patient est plongé dans une profonde immunodépression accentuée par la survenue de la maladie du greffon contre l’hôte (GVHD) traitée en première ligne par des corticostéroïdes et, en cas de cortico-résistance, en seconde ligne, par du Ruxolitinib.
Cette immunodépression fait le lit de réactivations virales ayant un impact fort sur la morbidité et la mortalité. L’efficacité des traitements anti-viraux classiques se trouve limitée en l’absence de reconstitution immunitaire spécifique. L’usage de lymphocytes T cytotoxiques antiviraux (Virus-specific T cells, VST) est une opportunité de traitement prometteuse de certaines réactivations virales. Notre équipe bénéficie d’autorisations MTI-PP pour l’isolement de VSTs anti- Adénovirus, -Cytomégalovirus (CMV) ou -Epstein Barr Virus (EBV), ces cellules étant isolées par une technique immunomagnétique basée sur la capture de l’IFNg produit (Cytokine Capture System, Miltenyi Biotec), sur le Prodigy (Miltenyi Biotec).
Si l’impact de la Méthylprednisolone in vitro sur l’expansion des VST n’affecte pas leurs propriétés cytotoxiques, ni la sécrétion d’IFNg (Campidelli et al, 2018), la question reste posée concernant l’impact du Ruxolitinib sur les VSTs. Des études réalisées sur l’effet du Ruxolitinib sur les CAR T cells ont montré une diminution dose-dépendante de la cytotoxicité des CAR T cells, cet effet étant réversible à l’arrêt du Ruxolitinib, et une altération durable de la sécrétion de cytokines issues des CAR T cells mais aussi des cellules immunitaires environnantes (Xu et al, 2022 ; Pan et al, 2020).
 
Nous avons souhaité évaluer l’impact du Ruxolitinib sur les fonctions lymphocytaires de trois VSTs différents. Les VSTs ont été mis en expansion in vitro selon trois conditions : sans Ruxolitinib (n=3), avec une concentration finale de 0,13 µmol/L (X, n = 3) ou de 0,065 µmol/L (X/2, n = 3), en accord avec les concentrations plasmatiques chez les patients. La prolifération après re-stimulation antigénique et l’alloréactivité résiduelle ont été évaluées respectivement par un Test de Transformation Lymphocytaire (TTL) et une Culture Mixte Lymphocytaire (MLR), in vitro. Les fonctions cytotoxiques ont été étudiées par un test de cytotoxicité, et la sécrétion d’interféron gamma (IFNg) a été évaluée par Elispot et par cytokines intra-cellulaires (Rapid Cytokine Inspector, Miltenyi Biotec).
Les résultats montrent que le Ruxolitinib diminue l’expansion des VSTs à mesure que la dose augmente  (différence significative à forte concentration de Ruxolitinib). La sécrétion d’IFN-γ et la cytotoxicité vis-à-vis de blastes présentant les antigènes viraux est significativement diminuée quelle que soit la dose de Ruxolitinib (p<0.05), Le test de prolifération montre des résultats contradictoires, la faible concentration de Ruxolitinib entraînant une diminution de la prolifération spécifique alors que la forte concentration de Ruxolitinib entraine une augmentation. On observe une tendance à l’augmentation de l’alloréactivité des VSTs après expansion en présence d’une forte dose de Ruxolitinib.
En conclusion, ces résultats permettent d’identifier un effet délétère du Ruxolitinib sur l’effet cytotoxique spécifique des VSTs. Une fois consolidés sur un échantillon de VSTs plus important, ils permettront d’émettre des recommandations.
 
Conclusion
Oui
Bibliographie
Adenovirus-specific T-lymphocyte efficacy in the presence of methylprednisolone: An in vitro study.
Campidelli A, Qian C, Laroye C, Decot V, Reppel L, D'aveni M, Bensoussan D. Cytotherapy. 2018 Apr;20(4):524-531.
 
Ruxolitinib reduces severe CRS response by suspending CAR-T cell function instead of damaging CAR-T cells. Xu N, Yang XF, Xue SL, Tan JW, Li MH, Ye J, Lou XY, Yu Z, Kang LQ, Yan ZQ, Yu L, Chen SN, Wang YT. Biochem Biophys Res Commun. 2022 Mar 5;595:54-61.
 
Ruxolitinib mitigates steroid-refractory CRS during CAR T therapy. Jing Pan, Deng B , Ling  Z, Song  W, Xu  J, Duan  J, Wang  Z , Chang  AH , Feng  X, Tan  Y. J Cell Mol Med. 2021 Jan;25(2):1089-1099.
 
 

Introduction/Objectif
Le HDL cholestérol est connu pour son rôle protecteur dans les processus d’athérosclérose. Récemment, ses propriétés anti-inflammatoires et anti-oxydantes ont été démontrées ainsi qu’une capacité de protection de l’endotoxinémie. Notre équipe a démontré que l’administration de HDL dans un modèle murin de GVH entraînait une réduction significative de la mortalité et du score clinique de GVH. L’objectif de ce travail est d’étudier l’effet direct du HDL cholestérol sur les 2 acteurs cellulaires principaux de l’alloréactivité : la maturation de cellules présentatrices d’antigènes professionnelles et les lymphocytes T.
Matériel & Méthode
Nous avons étudié cet effet in vitro, sur des cellules humaines, respectivement des cellules dendritiques issues de monocytes (MoDCs) et des lymphocytes T stimulés par billes Cd3/Cd28.
Résultats
Nous avons observé une diminution de la MFI du CD86 des MoDCs stimulées par du LPS à 1ng/mL avec HDL forte dose (3,902 +/- 2,219) par rapport au groupe LPS seul (9,214 +/- 0,2511). Lorsque le LPS a été préincubé avec du HDL, il induit également une expression de CD86 moins importante que lorsque le LPS est seul (2,222 +/- 0,1436). Concernant le CD80, on observe une tendance non significative à la diminution d’expression du CD80 sur les MoDCs cultivées. Cependant, nous ne mettons pas en évidence de modification du profil cytokinique des MoDCs en faveur d’une différenciation en DC tolérogène. 
Concernant les lymphocytes T, nous observons une réduction des index de prolifération et d’expansion des CD4+, et une réduction de l’index de réplication des CD8+ (p =0.028*, N=3) stimulés par bille en présence de HDL.
Au cours d'une réaction type MLR réalisée avec 3 couples donneurs-receveurs différents, nous avons observé une tendance à la diminution des différents index de prolifération des lymphocytes T, sans significativité statistique. De même, le HDL a entraîné une tendance à la diminution de la MFI CD86 sur les MoDCs CD1a+/CD14- en MLR.
Discussion
Ainsi, ce travail a montré que le HDL modifie les index de prolifération de LT CD3+ triés stimulés par billes. L’utilisation d’un tri CD3 positif a pu possiblement diminuer la stimulation ultérieure TCR du fait de l’internalisation du récepteur CD3 par la fixation de l’anticorps magnétique. Pour contrebalancer cet effet, nous avons doublé le ratio cellules/billes qui devait être selon les recommandations fournisseurs de 1 bille pour 2 cellules. Il serait intéressant de refaire cette expérience avec cette fois un tri négatif afin d’obtenir une fraction enrichie en CD3+ qui ne fixerait donc pas le CD3. Par ailleurs, afin d’apporter de la validité interne à nos résultats, il serait intéressant de mesurer l’interleukine-2 dans les surnageants qui est directement corrélée à la prolifération.  
Enfin, concernant l’effet du HDL sur les MoDCs, il semble que son action soit principalement dans sa capacité à diminuer leur maturation en captant les signaux de danger comme le LPS. Il serait intéressant de réaliser des MLR avec une pré-incubation des MoDCs par HDL afin d’évaluer si un prétraitement par HDL modifie leur capacité à jouer leur rôle de présentation d’antigène aux LT
En conclusion,
Ce travail renforce l’hypothèse d’un mécanisme d’action du HDL dans la GVH à travers son interaction potentielle avec les signaux de danger mais également par un effet direct sur la maturation et la prolifération des cellules alloréactives.

Dans un modèle murin de GVH, l'injection de HDJ chez les souris améliorent leur survie et diminue leur score de GVH aigue.

L'ajout de HDL à des lymphocytes T stimulés par billes CD3/CD28 entraîne une réduction des index de prolifération et d'expansion des CD4+.

La présence de HDL entraîne une réduction significative de la MFI du CD86 sur des MoDCs activées par LPS.

L'ajout de HDL au cours de MLR entraîne une tendance à la diminution des index de prolifération, non statistiquement significative.

Conclusion
Non
Bibliographie
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10. Murphy Andrew J., Woollard Kevin J., Hoang Anh, et al. High-Density Lipoprotein Reduces the Human Monocyte Inflammatory Response. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2008;28(11):2071-2077. doi:10.1161/ATVBAHA.108.168690

11. Murphy AJ, Woollard KJ, Suhartoyo A, et al. Neutrophil activation is attenuated by highdensity lipoprotein and apolipoprotein A-I in in vitro and in vivo models of inflammation. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2011;31(6):1333-1341. doi:10.1161/ATVBAHA.111.226258

12. Rueda CM, Rodríguez-Perea AL, Moreno-Fernandez M, et al. High density lipoproteins selectively promote the survival of human regulatory T cells. J Lipid Res. 2017;58(8):1514-1523. doi:10.1194/jlr.M072835 27

13. Elkord E, Williams PE, Kynaston H, Rowbottom AW. Human monocyte isolation methods influence cytokine production from in vitro generated dendritic cells. Immunology. 2005;114(2):204-212. doi:10.1111/j.1365-2567.2004.02076.x

14. Holzer M, Kern S, Trieb M, Trakaki A, Marsche G. HDL structure and function is profoundly affected when stored frozen in the absence of cryoprotectants. J Lipid Res. 2017;58(11):2220-2228. doi:10.1194/jlr.D075366

15. Feuerborn R, Becker S, Potì F, et al. High density lipoprotein (HDL)-associated sphingosine 1-phosphate (S1P) inhibits macrophage apoptosis by stimulating STAT3 activity and survivin expression. Atherosclerosis. 2017;257:29-37. doi:10.1016/j.atherosclerosis.2016.12.009

16. Cuvillier O. Les récepteurs de la sphingosine 1-phosphate - De la biologie à la physiopathologie. médecine/sciences. 2012;28(11):951-957. doi:10.1051/medsci/20122811013 

Après avoir révolutionné le domaine de l’oncologie et du diagnostic prénatal, de nouvelles applications utilisant l'ADN circulant (ADNcf) comme outil de diagnostic non invasif se multiplient comme en transplantation d’organes et en hématologie. Des études ont montré que 30% de l’ADNcf d’un sujet sain provient de la lignée érythrocytaire par énucléation des érythroblastes lors du passage en périphérie. Notre hypothèse est que l’ADNcf est un support d’information non invasif de l’avortement intra-médullaire érythroblastique et peut ainsi affiner la classification du diagnostic des anémies. L’objectif principal de cette étude est de mettre en place un système d’évaluation de l’origine érythroïde de l’ADNcf par une technologie innovante en utilisant un marqueur épigénétique spécifique des érythroblastes. Après extraction d’ADN génomiques (ADNg) issus de moelle osseuse et de sang total, une conversion au bisulfite est effectuée par le kit Epitect Plus Bisulfite Kit (Qiagen). Un système couplé amorces/sonde a été défini pour cibler le gène FECH dont le profil épigénétique d’une région régulatrice est spécifique de la lignée érythroïde (hypométhylé). La quantification du %FECH (copies d’ADN hypométhylées / Copies d’ADN total) est estimée à l’aide de la ddPCR (Biorad), en comparaison à des valeurs témoins pour des ADN méthylés et non méthylés. Alors qu’à partir du sang total, aucun signal spécifique n’est détecté sur l’ADNg, le %FECH pour l’ADNg issu de la moelle et le pourcentage d’érythroblastes du myélogramme sont corrélés. La répétabilité et la reproductibilité sont satisfaisantes avec des CV < 30%. Les résultats préliminaires portant sur l’ADNcf montrent des amplifications spécifiques, permettant de déterminer un %FECH. Au total, nous avons validé un système analytique innovant de biologie moléculaire épigénétique permettant d’évaluer l’origine érythroïde de l’ADNcf. La perspective principale de son application serait la caractérisation de la régénération médullaire d’une anémie en évitant tout acte invasif.
Conclusion
Oui
Bibliographie
Lam WKJ, Gai W, Sun K, et al. DNA of Erythroid Origin Is Present in Human Plasma and Informs the Types of Anemia. Clinical Chemistry. 2017;63(10):1614-1623. doi:10.1373/clinchem.2017.272401

Bien que le système HLA ne soit pas considéré comme un système de groupe sanguin erythrocytaire, il est observé depuis 1969, que les globules rouges ont la capacité d’exprimer certaines molécules HLA de classe I. Initialement considérés comme des éléments indéterminés et gênants pour les sérologistes, la présence d’antigènes HLA sur les globules rouges appelés Bg (Bennett-Goodspeed) a ensuite été corrélée à la présence de certains antigènes HLA. Le Bga a montré une association très forte avec l’antigène HLA B7, Bgb a été corrélé avec l’antigène HLA B18, et Bgc avec l’antigène HLA A28. L’association des antigènes Bg et HLA de classe I n’est pas systématique s'expliquant par le fait que les anticorps anti-HLA spécifiques d’un antigène puisse réagir avec d’autres antigènes. Cette particularité détermine des groupes de cross réactivité (CREG). Les anticorps anti-Bg sont souvent considérés comme une interférence lors de la recherche des anticorps irréguliers anti érythrocytaires (RAI) sur des panels de globules rouges possédant des antigènes Bg. Certaines équipes développent des techniques de détection des antigènes Bga à la surface des globules rouges afin de sélectionner les hématies Bga négatives pour la constitution des panels réactifs. Au contraire, nous proposons de tester une hématie Bga + dans certains contextes cliniques comme alerte d’une immunisation anti-HLA à prendre en considération. Notre équipe a identifié les spécificités anti-HLA (Luminex + OneLambda) de 30 sérums de patientes enceintes qui présentaient une réactivité (de (+) ou +) contre une hématie Bga + du panel de dépistage. La totalité des patientes présentait, à la fois, une forte allo-immunisation anti-HLA (MFI > 10 000) cytotoxique (C1q +, One Lambda) qui était toujours dirigée contre le HLA B7 comme antigène immunodominant, et à la fois, une hyper immunisation contre le CREG 7C et contre d’autres spécificités. Ces résultats font de ces femmes des patientes à risque de développer une inefficacité transfusionnelle en cas de transfusion plaquettaire. Par conséquent, l’introduction d’une hématie Bga+ peut-être utile lors de la RAI dans certains contextes. Cette réactivité Bga sera alors considérée comme une alerte d’une potentielle immunisation anti-HLA dans des contextes de greffes, transplantations ou transfusions plaquettaires prévues.
Conclusion
Oui

Introduction : Les cathéters veineux centraux (CVC) à émergence cutanée non tunnelisés avec plusieurs voies indifférenciées sont fréquemment utilisés dans les unités de soins aigus au sein des Hôpitaux Universitaires de Genève en Suisse. Ces dispositifs permettent l’administration des nombreux traitements irritants et vésicants pour les veines. Il est recommandé de ne pas fermer momentanément une ou plusieurs voies du CVC. Dans les unités de soins d’hématologie où sont admis des patients pour une allogreffe de cellules souches hématopoïétiques et ses complications, pour une chimiothérapie de leucémie aiguë ou une anémie aplasique sévère, ces dispositifs sont utilisés pendant quasi toute l’hospitalisation et retirés avant le retour à domicile. Les transports de ces patients hors des unités d’hématologie pour des soins ou examens spécifiques s’effectuent dans un lit de protection. Or, les manipulations des tubulures les exposent à des risques infectieux, mécaniques, à de l’inconfort et parfois à des restrictions de déplacement.
Objectif : Introduire la fermeture momentanée d’une ou de plusieurs voies du CVC avec une valve bidirectionnelle à pression neutre lors du transport des patients et en évaluer le bénéfice/risque. Le suivi de la fonctionnalité a été l’indicateur principal pour les résultats.
Méthode : L’implémentation de cette pratique a débuté en 2020 en plusieurs phases : la consultation des équipes infirmières pour définir le territoire d’application, l’élaboration des documents de références et la mise en place de workshops. La phase d’intervention a commencé le 01.09.2021 pendant une année. La documentation de chaque fermeture du CVC était effectuée avant et au retour du patient.
Résultats : Sur 330 transports prescrits, 77 documentations ont été recueillies et 63 ont été retenues pour l’analyse des données (19%). La durée moyenne de fermeture était de 4 heures. 90 % des voies étaient fonctionnelles au retour du patient.10 % ont présenté une résistance ponctuelle. Aucun lien n’a été établi entre la durée de fermeture et la résistance.
Conclusion : Malgré l’adhésion des soignants au début du projet, il a été observé un nombre limité de fermetures du CVC par rapport au nombre de transports prescrits pouvant s’expliquer par des craintes individuelles d’exposer ces patients fragiles à des risques supplémentaires. Cette nouvelle pratique n’a pas démontré de risque au niveau de la fonctionnalité du dispositif. Parallèlement, le suivi des bactériémies liées aux cathéters n’a pas montré d’augmentation des infections. Le gain de temps, le confort pour les patients et la sécurité décrite par les équipes d’accueil sont des données additionnelles non exploitées mais largement constatées.
Conclusion
Oui

Introduction
L’allogreffe de Cellules Souches Hématopoïétiques (CSH) est le modèle d’immunothérapie le mieux adapté pour le traitement de nombreuses maladies hématologiques malignes et non malignes. Bien que l’allogreffe de CSH soit une approche utilisée avec succès, la connaissance et la compréhension des complications dues à ce traitement restent des enjeux de taille pour élucider les mécanismes biologiques et développer de nouveaux diagnostics et thérapies. C’est dans ce contexte que le projet CRYOSTEM a été sélectionné par l’Agence Nationale pour la Recherche (ANR) dans le cadre de l'appel à projets « Cohortes » en 2010, financé par le Programme des Investissements d'Avenir. La constitution de la collection repose sur la collaboration de l’ensemble des unités de greffe françaises et de 28 Centres de Ressources Biologiques (CRB). La valorisation de la collection CRYOSTEM permet la réalisation de projets de recherche centrés sur la thématique des complications post-allogreffe, dont la maladie du greffon contre l’hôte. Depuis 2015, le réseau CRYOSTEM mène différentes stratégies afin de pérenniser au mieux sa collection et de favoriser les mises à disposition.
Matériel & Méthode
Après un embargo destiné à atteindre une masse critique d’échantillons et vérifier leur qualité, la valorisation des ressources biologiques de la collection s’est déployée aux niveaux national et international. Celle-ci passe essentiellement par un accès à la collection annuel incluant la soumission de projets de recherche mais également par des actions de communications et l’organisation de journées scientifiques. Par ailleurs, l’ouverture de la thématique à l’ensemble des complications en 2016 et la mise en place d’appels à projets conjoints avec la SFGM-TC en 2022 favorisent également les sorties d’échantillons.
Résultats
En presque 10 ans, les centres affiliés au réseau CRYOSTEM ont permis d’inclure plus de 6 000 patients et de 2 400 donneurs, permettant de constituer une collection unique en Europe. A ce jour, plus de 9 000 aliquots ont été mis à disposition pour 22 projets de recherche portés par des promoteurs académiques et privés, sélectionnés par le Comité scientifique de CRYOSTEM et des experts internationaux. Ces travaux ont permis l’émergence de 9 publications scientifiques d’envergure. 
Discussion
Les stratégies de valorisation mises en place par le réseau CRYOSTEM ont permis de multiplier la taux de mise à disposition par 9 entre 2015 et 2022. Cette augmentation est notamment expliquée par des évolutions dans les conditions de soumission et de sélection des projets. Cependant, le réseau CRYOSTEM doit poursuivre ses efforts et optimiser sa collection pour favoriser la valorisation et dépasser le seuil actuel des 4,3% de sorties d’échantillons.
Conclusion
La collection CRYOSTEM est la première et l’unique collection Européenne dédiée aux complications de l’allogreffe de CSH. Elle fournit à la communauté scientifique des ressources biologiques de haute qualité pour améliorer les connaissances médicales sur l’allogreffe de CSH et in fine la qualité de soins des patients. Aujourd’hui, le réseau CRYOSTEM poursuit ses efforts en identifiant d’autres stratégies pour accroître la valorisation en procédant à l’optimisation de sa collection, telles que le monitoring des données cliniques et biologiques et la priorisation de la conservation des échantillons scientifiquement pertinents.
Conclusion
Oui

INTRODUCTION 
Environ 20% des états réfractaires de transfusion plaquettaire sont liés à des allo-anticorps dirigés contre des HPA (Human Platelet Antigen). Ces états nécessitent de sélectionner des donneurs de concentrés plaquettaires compatibles. Les patients qui sont de plus en plus d’origine diverse sont susceptibles d’être de statut HPA rare, ce qui entraine des états réfractaires par allo-immunisation contre des HPA très fréquents dans notre population.
OBJECTIF 
Le but de notre travail a été de mettre en place une technique de génotypage des systèmes HPA rares, non explorés par les techniques de routine (HPA-1 à -6, -9 et -15). 
MATERIELS ET METHODES 
Nous avons développé un panel de séquençage NGS ciblé par capture afin d’identifier l’ensemble des exons, UTR et promoteur des gènes GP1BA, GP1BB, ITGA2, CD109, ITGB3 et ITGA2B codant pour 34 systèmes HPA. Ce nouveau système de capture (Roche®) présente l’avantage d’utiliser deux jeux de sondes de capture permettant de renforcer la spécificité des fragments séquencés. L’analyse des données a été réalisé en collaboration avec Xegen®.
RESULTATS 
Nous avons validé cette technique par l’analyse de 12 échantillons de référence (CQI et CQE) de génotypage HPA classique connu. Pour les systèmes HPA rares, la validation a été effectuée à partir de l’analyse des données exomiques issus du projet 1000génomes et de certains échantillons issus de ces populations et présentant des antigènes HPA rares. Enfin, l’analyse d’une cohorte de 60 donneurs de phénotype sanguin R0r a permis d’identifier des HPA rares.
CONCLUSION 
Pour conclure, la capacité de cette nouvelle technologie à identifier 34 systèmes HPA en fait une méthode de choix pour l’exploration des patients et des donneurs de cytaphérèse.
Conclusion
Oui

L’analyse du chimérisme post transplantation est un examen primordial dans le suivi de la prise du greffon et dans le suivi de la maladie résiduelle après greffe de CSH. Les techniques de type STR ou q-PCR ont fait la preuve de leurs performances depuis longtemps, mais avec des inconvénients propres à chaque technique : une sensibilité insuffisante pour la technique STR et une linéarité insuffisante pour la q-PCR au-delà de 30% avec choix obligatoire d’un ou deux marqueurs de suivi d’après le génotype, obligeant certains laboratoires à faire cohabiter 2 techniques afin de répondre au mieux aux attentes des cliniciens dans le suivi de leurs patients.
L’arrivée de la technologie NGS dans l’analyse du chimérisme est récente dans nos laboratoires. D’après une étude récente, seuls 7% des laboratoires interrogés utilisent cette technique. Nous avons voulu faire un premier bilan après quelques mois d’utilisation dans notre laboratoire d’un kit AlloSeq HCT de CareDx, commercialisé en France par la société Nephrotek.
Nous avons choisi ce kit en raison de la faible quantité d’ADN nécessaire pour la technique (10 ng), en raison du ‘’hands-on-time’’ assez réduit, avec une seule PCR (PCR d’amplification et d’indexation dans 1 seul programme d’1 heure environ), et avec l’avantage que les échantillons pré greffe pour le génotypage et les échantillons post-transplantation sont testés avec le même réactif, dans le même run. Il n’y a plus de gestion de réactifs distincts ou de marqueurs donneurs ou receveur. Le séquençage est réalisé sur un séquenceur MiSeq (Illumina), avec des flow cells V3 150, en paired-end sequencing avec une durée de run de 17 heures permettant l’analyse de 24 à 48 échantillons par run.
Ce kit repose sur l’analyse de 202 marqueurs de type SNP répartis sur les 22 chromosomes autologues, dont la sélection est tenue secrète par CareDx, mais avec l’assurance qu’aucun des SNP n’est situé sur une zone connue de recombinaison impliquée en pathologie hématologique.
Nous avons aussi la possibilité avec le logiciel AlloSeqHCT d’analyser les chimérismes pour des patients ayant bénéficié d’une greffe avec 2 donneurs différents.
 
Nous avons réalisé une étude intermédiaire de cette analyse dans notre laboratoire portant sur le génotypage de 349 couples donneur/receveur
Les 202 marqueurs proposés permettent d’avoir un nombre de marqueurs informatifs important, et notre étude démontre que nous obtenons une informativité de 100%. Associé à une profondeur moyenne de 3326 sur 1033 tests analysés, nous avons fixé le seuil de sensibilité à 0.3 % sur cellules totales comme sur cellules triées CD3, CD33, CD19 ou CD34.
La reproductibilité de la technique NGS, et les corrélations avec les techniques STR et q-PCR sont excellentes, les r2 obtenus sont compris entre 0.95 et 0.99. Les CV de la technique sont satisfaisants à 1.4% pour une valeur théorique de 5% et de 13.3% pour une valeur théorique de 0.5%.
 
L’utilisation de la technique NGS donne toute satisfaction dans notre laboratoire en raison de la simplicité du protocole technique, mais aussi en raison de la faible quantité d’ADN nécessaire pour la technique et de sa linéarité de 0.3 à 100%, qui nous permet de réaliser très couramment des analyses sur fractions cellulaires triées.
Conclusion
Non

 Introduction/ Objectifs
Le locus HLA-DPB1 a pris une place importante depuis quelques années dans la sélection des donneurs non apparentés en greffe de CSH. En effet la détermination des groupes TCE et la précision de la permissivité des combinaisons HLA-DPB1 mismatch a amené les greffeurs à prendre en considération ce locus DPB1. La possibilité d’offrir à nos receveurs de CSH un greffon HLA-DP permissif ou match est un élément que nous avons voulu apprécier rétrospectivement sur les donneurs retenus pour la greffe et sur les donneurs non apparentés proposés aux greffeurs du CHU de Lyon.
Matériel et Méthode
Nous avons étudié 463 greffes de CSH réalisées entre 2014 et 2023 au CHU de Lyon, adultes et pédiatriques, le statut permissif ou non permissif des mismatch DPB1 en utilisant la classification TCE3 publiée en 2015 et comparé avec les données disponibles de la littérature.
Nous avons étudié sur les donneurs non apparentés potentiels identifiés avec typage DPB1* disponible (1302 donneurs) pour nos receveurs adultes inscrits (610 receveurs) la permissivité HLA-DP et évalué pour nos receveurs la potentialité de trouver un donneur DP match ou permissif.
Résultats
*Etude sur greffes réalisées
317 greffons infusés sur 463 où les données DPB1 sont disponibles sont MM DP Permissifs ou match soit 68.4 %, dont 238 sur les 10/10 (70.1%) et 78 sur les 9/10 et 1 sur le 8/10 (62.3%)
Un receveur TCE3 est greffé en DP permissif dans 68.3% des cas, un receveur TCE2 dans 23.8% des cas, un receveur TCE1 dans 8% des cas
De 2014 à 2018, sur 242 greffes étudiées, on trouve 151 greffons DP Permissifs soit 62.4%,
de 2019 à 2023, sur 221 greffes étudiées, on trouve 166 greffons DP Permissifs soit 75.1%
 
*Permissivité DPB1 des donneurs potentiels identifiés (les receveurs ne disposant pas de donneurs d’emblée ou décédés en cours d’inscription ne sont pas retenus ou greffés haplo rapidement)
*148 receveurs ont un ou plusieurs donneurs 12/12 (206 donneurs 12/12)
*263 receveurs ont 1 ou plusieurs donneurs 10/10 (642 donneurs 10/10), dont 403 DP permissifs
* 191 receveurs ont 1 ou plusieurs donneurs 9/10 (417 donneurs 9/10) dont 264 DP permissifs ou match
Soit au total 893 donneurs permissifs sur les 1302 analysés 68.6%
Au total 479 receveurs peuvent disposer d’un donneur DP permissif : 78.5% (12/12 +/- 10/10 +/- 9/10)
Discussion
 Le nombre de greffons infusés permissifs est conforme aux données de la littérature (Gragert et al. JTCT 2022) 70.1% à Lyon vs 71.4% pour les donneurs 10/10 de l’étude.
La difficulté de trouver des donneurs DP permissifs pour les receveurs TCE1 et TCE2 est confirmée.
En reprenant par année de greffe, on note une augmentation du nombre de donneurs sélectionnés en MM DP permissif ou match, probablement liée à un choix clinique mais aussi à la disponibilité sur Syrenad des typages DPB1 des donneurs sur les fichiers permettant de les sélectionner prioritairement (42% des 42.674.000 donneurs WMDA sont typés en HLA-DPB1 en 2022)
Notre étude des donneurs potentiels proposés par notre centre receveur aux cliniciens reflète cette attitude systématique d’approche de donneurs typés en HLA-DP et de sélection de mismatch DP permissifs proposés aux cliniciens
 
Conclusion
Non

L'allogreffe de Cellules Souches Hématopoïétiques (CSH) est le traitement curatif des myélofibroses primaires ou secondaires. L’identification d’un donneur apparenté compatible est un frein à l’accès à l’allogreffe. L’utilisation de CSH de donneurs non apparentés ne fournit pas de résultats satisfaisants sur la survie globale et/ou de complications post-greffe. La promotion des greffes haplo-identiques est un tournant pour ouvrir des perspectives de traitement pour des malades atteints de myélofibrose en attente d’une allogreffe notamment en l’absence d’un donneur HLA compatible. Dans ce contexte, le protocole clinique de phase II FIBRAPLO, promu par l’Assistance Publique des Hôpitaux de Paris (AP-HP) vise à évaluer l’allogreffe de patients atteints de myélofibrose primaire ou secondaire, à partir d’un donneur familial haplo-identique et traité, lors du conditionnement, par Tréosulfan combiné à Fludarabine et Thiotepa. Le critère principal est la survie à 1 an post-greffe sans myélofibrose ni rejet. Dans ce contexte, il est essentiel de disposer d’une collection d‘échantillons biologiques prospective, annotée, provenant de patients inclus dans ce protocole. Ce matériel, associé à des données cliniques et biologiques, permettra de démontrer que la greffe haplo-identique associée à un conditionnement chez les patients atteints de myélofibrose pourrait donner de meilleurs résultats qu’une greffe d’un donneur HLA, dont 9/10 ne correspondrait pas, et proches d’un donneur compatible non-apparenté.
Depuis 2021, l’AP-HP, des centres d’allogreffe et le réseau CRYOSTEM collaborent pour développer l’étude ancillaire multicentrique FIBRAPLO. Les services cliniques d’hématologie/allogreffe sont chargés de l’inclusion, du suivi des patients et de leurs prélèvements sanguins. 19 des Centres de Ressources Biologiques (CRB) du réseau CRYOSTEM, à l’origine de la 1ère biocollection européenne liée aux complications post-allogreffe de CSH, s’associent aux processus de traitement et stockage des échantillons. Plusieurs types d’échantillons ont été prélevés pré- et post-greffe, selon une cinétique définie et des procédures opérationnelles standardisées et harmonisées. Les données cliniques sont centralisées et monitorées dans un eCRF dédié, interopérable avec un eCRF « biologique » pour les données des échantillons.
Depuis le 30/07/2021, date de la première inclusion, 33 patients ont été inclus, correspondant à 148 prélèvements sanguins, dérivés en 226 aliquots de sérum et 59 aliquots de culots cellulaires. 71.5% des échantillons de sang ont été traités en moins de 4h, avec un temps de traitement médian estimé à 2h45, limitant la dégradation des protéines dans les échantillons de sérum.
Actuellement le nombre de patients à inclure est atteint. Les données de survie des patients sont en cours de suivi. Tous les échantillons sont stockés de manière décentralisée dans les CRB. L’enjeu est de rapatrier les aliquots pour procéder aux analyses.
La collaboration AP-HP/CRYOSTEM ouvre des perspectives de recherche en donnant accès à la communauté scientifique à des matières premières de qualité. Cette étude aura un impact sur la prise en charge thérapeutique de patients atteints de myélofibrose primaire ou secondaire. Ce nouveau partenariat, avec un promoteur de recherche clinique pour la mise en œuvre d’une étude ancillaire, ouvre la perspective au réseau CRYOSTEM pour constituer des biocollections à façon, en réseau et harmonisées, dans le cadre de l’allogreffe de CSH.

Réseau de l'étude ancillaire FIBRAPLO

Cinétique prélèvements sanguins étude ancillaire FIBRAPLO

Conclusion
Oui

Introduction : La maladie du greffon contre l’hôte ou Graft Versus Host Disease (GVHD) est une des complications les plus graves de la greffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH) allogéniques.

Les lymphocytes T innés (LTI), dont font partie les lymphocytes iNKT, MAIT, LTI-CD8 et TCR-gd se distinguent par un programme de différenciation dépendant en particulier de l’expression des facteurs de transcription PLZF et Eomes et de l’acquisition de fonctions innées comme en particulier la production d’IFN-g en réponse au couple de cytokines pro-inflammatoires IL-12 et IL-18. Des données de la littérature suggèrent que l’évolution/ou la sévérité de la GVHD chronique (GVHDc) est associée à un défaut des LTI iNKT et MAIT.

 

Objectif : L’objectif de ce travail est d’identifier en cytométrie spectrale une signature immunitaire propre à la GVHDc caractérisée par une perte du caractère inné des LTI.

 

Matériel et méthode : les cellules mononucléées (CMN) du sang périphérique de 9 patients (4 hommes et 5 femmes) ayant bénéficié d’une allogreffe de CSH compliquée d’une GVHDc sévère résistant au traitement immunosuppresseur, ont été étudiées avec le cytomètre Aurora (Cytek) de la plateforme Image’UP de l’Université de Poitiers, et comparées aux CMN de 8 donneurs sains (4 hommes et 4 femmes).

 

Résultats : Nous mettons en évidence chez les patients ayant une GVHDc un effondrement de la fréquence relative[AH1]  (au sein du compartiment lymphocytaire T) des LTI : iNKT, MAIT et T-Vd2 (mais non T-gd Vd1 et T-Vd3). Cet effondrement est associé à une perte de l’expression de PLZF, laquelle est aussi observée dans les cellules NK. Enfin, comme les cellules NK, les populations de LTI (iNKT, MAIT, Vd2 et LTI-CD8) ont perdu la capacité à exprimer l’IFN-g en réponse à la combinaison de cytokines IL-12 et IL-18.

 Discussion et conclusion : Nos données suggèrent qu’au cours de la GVHDc, il existe un défaut commun des LTI et des cellules NK caractérisé par une perte ou une absence d’expression de PLZF ainsi que de leur potentiel effecteur en réponse à des stimuli innés.
Conclusion
Non

Les recueils de cellules souches hématopoïétiques peuvent être réalisés avec différents séparateurs.
A Toulouse, depuis fin 2020, un séparateur OPTIA a été mis en service, conduisant à la nécessité d’évaluer les critères sur le choix d’utilisation d’un séparateur plutôt que l’autre.
Une étude rétrospective a été mise en place entre le 1er Janvier 2021 et le 30 juin 2023, incluant tous les recueils de CSH autologues, réalisés avec la Spectra OPTIA ou la COMTEC. Les données d’aphérèse et de thérapie cellulaire ont été analysées.
L’objectif était de définir des orientations d’utilisation en considérant les données clinico-biologiques du patient, l’organisation du service d’aphérèse et les indicateurs de contrôle qualité de chaque service.
Les critères étudiés étaient liés au patient, au séparateur, et aux techniques de thérapie cellulaire.
513 recueils ont été étudiés concernant 301 patients (Graphique 1).
322 prélèvements étaient réalisés sur COMTEC et 191 sur OPTIA.
L’efficacité de collecte était légèrement supérieure avec la COMTEC, malgré une dispersion supérieure (p<0,05). Le pourcentage moyen de cellules mononuclées, et le nombre de cellules nucléées dans la poche étaient identiques (p>0,05). (Graphiques 2 et 3)
Les greffons issus d’une seule cytaphérèse (125 recueils) avaient des rendements en CD34 après décongélation et des viabilités plus faibles sur COMTEC (p<0,05), quelques soient le nombre de poches congelées. (Graphique 4)
La durée moyenne de sortie d’aplasie était de 11 jours, quelque soient le séparateur et les données de décongélation.
L’intégration des critères clinico-biologiques, et techniques dans le choix du séparateur, les jours de recueil, permettront permettent d’adapter la prise en charge du patient, au patient lui-même, du prélèvement à la réinjection.

Répartition des patients en fonction de la pathologie - Toulouse 2021-2023 (N=301)

Boxplot - Comparaison des volumes de recueil (en mL), concentrations en cellules nucléées (en G/L) et nombre de cellules nucléées (en G), en fonction du type de séparateur - Toulouse 2021-2023

Boxplot - Comparaison des % de cellules CMN et du rendement de recueil, en fonction du type de séparateur - Toulouse 2021-2023

Boxplot - Comparaison des rendements de CD34 et des viabilité après décongélation, en fonction des séparateurs - Toulouse 2021-2023

Conclusion
Oui

OBJECTIVES: Sickle cell disease (SCD) is an inherited hemoglobinopathy that can lead to vaso-occlusive crises (VOCs) and significant morbidity despite the availability of current treatment options. This study describes the healthcare resource utilization (HCRU) of patients with SCD with recurrent VOCs in France.
METHODS: This longitudinal, retrospective cohort study utilized the French National Health Data System database (SNDS, système national des données de santé). Patients were identified by having an inpatient claim or registration in the long-term condition database (ALD, affection longue durée) with a diagnosis of SCD between January 1, 2012, and March 1, 2019. Eligible patients with SCD were required to have ≥2 VOCs/year in any 2 consecutive years. Patients were required to have ≥1 year of data before and after their index date (i.e., the second VOC in the second consecutive year). Patients were followed from index until death or study period end (March 1, 2020). Demographics were assessed at index. The rates of VOCs and HCRU were summarized per patient per year (PPPY) during the follow-up period.
RESULTS: A total of 4,602 patients with SCD with recurrent VOCs were included. The mean age of patients was 19.8 years, and 2,384 (51.8%) patients were female. Mean length of follow-up was 4.4 years. Patients averaged 3.8 VOCs PPPY during the follow-up period. Patients averaged 5.7 inpatient hospital admissions PPPY; of these, 2.9 were day cases and 2.9 were overnight stays lasting ≥1 day. Patients also averaged 6.0 emergency room visits, 6.6 outpatient visits, and 13.4 outpatient prescriptions (all PPPY).
CONCLUSIONS: There is substantial HCRU associated with the care of patients with SCD with recurrent VOCs in France, driven by frequent inpatient hospitalizations, including those for VOCs, emergency room visits, outpatient visits, and prescriptions.
 
Conclusion
Non

OBJECTIVES: Sickle cell disease (SCD) is an inherited hemoglobinopathy characterized by abnormal sickled hemoglobin that can lead to vaso-occlusive crises (VOCs), significant morbidity, and early mortality despite availability of current treatment options. This study describes the mortality and clinical complications in patients with SCD with recurrent VOCs in France.
METHODS: This longitudinal, retrospective cohort study utilized the French National Health Data System database (SNDS, système national des données de santé). Patients were identified by having an inpatient claim or registration in the long-term condition database (ALD, affection longue durée) with a diagnosis of SCD between January 1, 2012, and March 1, 2019. Eligible patients with SCD were required to have ≥2 VOCs/year in any 2 consecutive years. Patients were required to have ≥1 year of data before and after their index date (i.e., the second VOC in the second consecutive year). Patients were followed from index until death or study period end (March 1, 2020). Demographics were assessed at index. Mortality (proportion of population, rate [deaths per 100 person-years], and mean age of death) and clinical complications (proportion of population) were summarized descriptively during follow-up.
RESULTS: In total, 4,602 patients with SCD with recurrent VOCs were included. The mean age of patients was 19.8 years, 51.8% of whom were female. Mean length of follow-up was 4.4 years. Patients experienced an average of 3.8 VOCs per patient per year. In total, 101 (2.2%) patients died during follow-up. Mortality rate was 0.64 deaths per 100 person-years. Mean age of death was 39.3 years. The most prevalent clinical complications were anemia/leukocytosis (44.1%), infections (42.0%), multi-organ failure (38.2%), chronic pain (26.6%), and gallbladder disease (17.8%).
CONCLUSIONS: Despite available care, patients with SCD with recurrent VOCs experience significant SCD-related clinical complications and increased mortality risk, highlighting the need for innovative therapies for these patients.  
Conclusion
Non

OBJECTIVES: Patients with transfusion-dependent β-thalassemia (TDT) have reduced or absent β-globin production and require regular red blood cell transfusions (RBCTs) for survival. This study describes the healthcare resource utilization (HCRU) associated with TDT in France.
METHODS: This longitudinal, retrospective cohort study utilized the French National Health Data System database (SNDS, système national des données de santé). Patients were identified by having an inpatient claim or registration in the long-term condition database (ALD, affection longue durée) with a diagnosis of β-thalassemia between January 1, 2012, and March 1, 2019. Eligible patients with TDT were required to have ≥8 RBCTs/year in any 2 consecutive years. Patients were required to have data for ≥1 year before and after their index date (i.e., the eighth transfusion in the second year of 2 consecutive years). Patients were followed from index until death or study period end (March 1, 2020). Demographics were assessed at index. The rates of RBCTs and HCRU were summarized per patient per year (PPPY) during the follow-up period.
RESULTS: A total of 331 patients with TDT were included. The mean age of patients was 26.1 years, and 164 (49.5%) patients were female. The mean length of follow-up was 4.9 years. Patients with TDT averaged 13.5 RBCTs PPPY during the follow-up period. Patients averaged 14.8 inpatient hospital admissions PPPY; of these, 13.8 were day cases and 1.0 were overnight stays lasting ≥1 day. Patients also averaged 3.3 emergency room visits, 6.3 outpatient visits, and 16.9 outpatient prescriptions (all PPPY).
CONCLUSIONS: Patients with TDT in France require substantial HCRU associated with their care. HCRU is driven by frequent RBCTs, inpatient hospital admissions, and significant utilization rates of emergency room visits, outpatient visits, and prescriptions
Conclusion
Non

OBJECTIVES: Transfusion-dependent β-thalassemia (TDT) is a rare hereditary disorder wherein patients have reduced or absent β-globin and require regular red blood cell transfusions (RBCTs). Patients with TDT experience significant complications associated with the disease and iron overload that can lead to early mortality and significant clinical burden. This study describes the mortality and clinical complications in patients with TDT in France.
METHODS: This longitudinal, retrospective cohort study utilized the système national des données de santé’ (SNDS) database in France. Patients were identified by having an inpatient claim or registration in the long-term condition database (ALD, affection longue durée) with a diagnosis of β-thalassemia between January 1, 2012, and March 1, 2019. Eligible patients with TDT were required to have ≥8 RBCTs/year in any 2 consecutive years. Patients were required to have data for ≥1 year before and after their index date (i.e., the date of the eighth transfusion in the second year of 2 consecutive years). Patients were followed from index until death or study period end (March 1, 2020). Demographics were assessed at index. Mortality (proportion of total population, rate [deaths per 100 person-years], and mean age of death) and clinical complications (proportion of total population) were summarized descriptively during the follow-up period.
RESULTS: In total, 331 patients with TDT were included. Their mean age was 26.1 years, and 164 (49.5%) patients were female. Mean length of follow-up was 4.9 years. During follow-up, 15 (4.5%) patients in the cohort died. Mortality rate was 1.16 deaths per 100 person-years. Mean age of death was 52.5 years. The most prevalent complications were endocrine complications (26%), hepatobiliary complications (23%), cardiovascular complications (19%), and renal complications (9%).
CONCLUSIONS: Despite available care, patients with TDT experience numerous TDT-related clinical complications and increased mortality, underscoring the need for innovative therapies in this space.
Conclusion
Non